La citogenética molecular (GISH-FISH) revela homologáis genómicas en el género Zea.

GRACIELA GONZALEZ; ANA MARIA GARCIA; VIVIANA CONFALONIERI; CECILIA COMAS; LIDIA POGGIO

Pergamino

Simposio; XXVI Congreso Argentino de Genética; 2007

Sociedad Argentina de Genética

La hibridación in situ utilizando como sonda ADN geonómico total (GISH) revela homologías especificas del ADN en lo que respecta principalmente a secuencias repetidas, siendo muy útil en estudios evolutivos ya que demuestra afinidades genomicas y detecta homologias entre cromosomas de especies relacionadas. El GISH  discrimina directamente aquellos genomas que presentan secuencias muy divergentes, pero también permite revelar diferencias entre genomas altamente homólogos, entre especies muy relacionadas, si se aplican bloqueos genomicos. Para ellos se adicionan altas concentraciones de ADN no marcado de una especie determinada (especie A)  a las células de la especie relacionada que se van a hibridar (especie B), y se utiliza como sonda el ADN marcado de la misma especie a hibridar (especie B). Por otro lado el FISH (Hibridación In Situ Fluorescente), utilizando como sonda a distintos ADN de secuencia conocida o no, permite la localización de las mismas sobre los cromosomas y es útil para realizar mapeos físicos o identificaciones cromosomicas. En el marco del estudio de la relaciones evolutivas dentro del genero alopoliploide Zea, se realizaron experimentos de GISH y FISH con el objetivo de revelar las homologias genomicas existentes entre el maíz ( Zea mays ssp, mays, 2n=20) y el teocinte Zea perennis, (2n=40), así como también conocer la naturaleza del apareamiento meiótico en su híbrido F1 (2n=30). Los resultados de GISH indicaron que el maíz posee una gran cantidad de secuencias que no presentan homologia molecular con las del genoma de Zea perennis, entre las que se encuentran las secuencias repetitivas que componen a los Knobs heterocromaticos de maíz. Se realizaron también ensayos de GISH utilizando bloqueos genomicos sobre células meioticas del híbrido, lo cual permite discriminar a los cromosomas de las especies parentales. Finalmente se analizo la posición de la secuencia ribosomal 45s en el híbrido y en sus progenitores. La detección revelo dos señales de hibridación sobre un par cromosómico en maíz, 4 señales sobre dos pares de cromosomas en Zea perennis y tres señales de hibridación sobre un trivalente en el híbrido. Esto ultimo indica que el ADNr esta localizado en los genomas ancestrales que presentan el mayor grado de apareamiento en el híbrido. Por lo tanto, estos estudios permitieron revelar las homologias moleculares existentes entre el maíz y Zea perennes, así como también conocer la naturaleza del apareamiento melotico en el híbrido. Por otra parte, tanto el GISH como el FISH contribuyeron en estudios evolutivos y de caracterización cromosomita en el genero Bromus.