Efectos del Cloruro de Cobalto en el área CA3 del Hipocampo sobre un Modelo Murino de Hipoxia-Isquemia

LOGICA, TAMARA; SARACENO, GUSTAVO EZEQUIEL; CAMPANILLE, VERÓNICA; ROMERO, JUAN IGNACIO; HOLUBIEC, MARIANA; KOLLIKER FRES, RODOLFO; CAPANI, FRANCISCO; CASTILLA, ROCÍO

Mendoza

Congreso; III Congreso Argentino de Microscopía; 2014

Sociedad Argentina de Microscopía (SAMIC)

La asfixia perinatal (AP) es una complicación obstétrica asociada a una alta tasa de morbimortalidad, con una incidencia de 1-5/1000 nacidos vivos [1]. Es además un importante factor de riesgo para diversos trastornos del neurodesarrollo [2-5]. Hasta el momento no se ha desarrollado ninguna terapia específica que pueda contrarrestar las alteraciones provocadas por la AP. Se ha observado que una serie repetitiva de pequeños eventos isquémicos aplicados tras un evento hipóxico-isquémico principal (postcondicionamento) activa diferentes mecanismos neuroprotectores que favorecen la supervivencia neuronal y preservan los procesos de memoria y aprendizaje alterados por la AP [6-8].Estudiamos los efectos de la administración de Cloruro de Cobalto (CoCl2) como posible terapia neuroprotectora dado que en condiciones de normoxia gatilla cambios transcripcionales que mimetizan la respuesta del organismo ante un evento hipóxico [9, 10]. Con este fin, ratas Sprague Dawley machos de siete días fueron sometidas a un modelo de hipoxia-isquemia (H-I) [11] por ligadura de la arteria carótida común derecha y una posterior asfixia aguda por sometimiento a una atmósfera de N2 al 100% durante 3 min. A las 24 hs se les administró subcutáneamente 60mg/kg de CoCl2.Se ha determinado que el área CA3 del Hipocampo es una de las más sensibles a la H-I. Evaluamos el efecto del CoCl2 sobre el daño neuronal en esta zona por medio de inmunohistoquímica con anticuerpos anti NeuN a los 30 días postnatales.Observamos una disminución en el número de neuronas NeuN+ (p<0,01) en la capa piramidal de los animales sometidos a H-I así como un aumento en el número de neuronas con alteración en el patrón de tinción de NeuN (p<0,001) con respecto al grupo control inyectado con vehículo. Esta disminución fue significativamente menor (p<0,01).en los animales tratados con CoCl2.Estudiamos el efecto del tratamiento sobre los astrocitos en el estrato radiado del área CA3 hipocampal por inmunohistoquímica utilizando el anticuerpo anti GFAP. Observamos un aumento en el número de astrocitos reactivos en animales H-I con respecto a los controles (p<0,05). En los animales H-I a los que se les suministró CoCl2 estos efectos fueron significativamente revertidos (p<0,05). Evaluamos también el área reactiva para cada uno de los grupos, no encontrando entre ninguno de ellos diferencias significativas.Con el objetivo de corroborar si estos efectos se expresaban también a nivel conductal se realizaron pruebas neuroconductuales indicadoras de daño en el neurodesarrollo. Se observaron mejorías significativas en todos días de testeo para las pruebas de reflejo de marcha y de geotaxis negativa en animales sometidos a H-I tratados con CoCl2 respecto al grupo H-I tratado con vehículo. Por otro lado no se obtuvieron diferencias significativas en la prueba de suspensión en la soga.Podemos concluir que la administración de CoCl2 produjo una significativa recuperación a nivel neuronal, astrocitario y conductual. Si bien es necesaria la realización de otros estudios, estos resultados parecerían indicar que el CoCl2 es un buen candidato para tratar las alteraciones producidas por la AP.