Desarrollo de marcadores moleculares del tipo SCAR para la identificación de Azospirillum brasilense Az39

CONIGLIO, ANAHÍ; GUALPA, JOSÉ; MOLINA, ROMINA; PUENTE, MARIANA; CASSÁN, FABRICIO

Lima

Congreso; III Conferencia Iberoamericana de Interacciones Beneficiosas Planta-Microorganismo-Ambiente (IBEMPA).; 2017

Universidad Lamolina

Azospirillumbrasilense Az39 fue seleccionada en la décadadel ?80 como la cepa recomendada por INTA para la formulación de inoculantesbiológicos. Gracias a su capacidad de colonizar tejidos vegetales y promover sucrecimiento aumenta la productividad fundamentalmente de cultivos como maíz,trigo y soja en sistemas de co-inoculación. Hasta el momento es posible evaluar la calidad de losformulados en base a Az39, a través de diferentes abordajes, evaluando aspectosfenotípicos y genotípicos que nos dan una idea general sobre la identificación hastanivel de género, sin embargo no existen protocolos en Argentina que permitanautenticar la identidad de la cepa Az39 de A.brasilense en formulaciones comercializadas. En contrapartida, el caminotransitado pone de manifiesto que gracias al desarrollo de herramientasmoleculares basadas en la secuencia del ADN, es posible actualmente establecerla identidad de ciertos microorganismos de manera confiable y precisa. Por ello, se planteo desarrollar una metodología que permita laidentificación certera de A. brasilenseAz39 y con esto lograr la evaluación de la calidad de bioinsumos. Con lasecuencia completa del genoma completo de Az39 y mediante el uso deherramientas bioinformáticas, se llevó a cabo una PCR-AFLPdel inglés, amplified fragment length polymorphism, in silico como primera instancia. Los resultados permitieronreconocer fragmentos de ADN presentes únicamente en el genoma de la cepa de interésy estas secuencias fueron utilizadas para el diseño de cuatro pares de cebadores.La amplificación por PCR utilizando estos oligonucleótidos arrojó comoresultado amplicones específicos para esta cepa. El diseño de cebadores,basados en el polimorfismo de ADN, específicos para Az39, permitió ladeterminación de la presencia de la cepa en cultivos puros mediante amplificacióny posterior electroforesis. Estas metodologías son accesibles, y hacen laidentificación de rutina más certera.