Recuento diferenciado de Azospirillum brasilense y otros microorganismos en inoculantes mixtos.

TORRES, DANIELA; GUALPA, JOSÉ; CONIGLIO, ANAHÍ; ROSAS, SUSANA; CASSÁN, FABRICIO

Pucon

Workshop; III Taller Latinoamericano de PGPR; 2016

Universidad de la Frontera

Las rizobacterias promotoras del crecimiento vegetal (PGPR) son utilizadas para la formulación de inoculantes en la agricultura, lo que está relacionado con la creciente disminución del uso de fertilizantes químicos en cultivos. En Argentina, desde hace más de cuatro décadas se utiliza la cepa nativa Az39 de Azospirillum brasilense para la formulación de inoculantes para más de 15 especies vegetales debido a sus características como PGPR. El objetivo de este trabajo fue desarrollar un medio de cultivo que nos permita diferenciar A. brasilense de otros microorganismos presentes en formulaciones mixtas o con más de un principio activo. Para la formulación del medio se evaluaron diferentes fuentes de carbono y nitrógeno, suplementadas con nutrientes esenciales, hasta encontrar una formulación capaz de inhibir el desarrollo de A. brasilense y permitir el crecimiento de otros microorganismos. Para ello, se obtuvieron cultivos puros de A. brasilense Az39 y  Bradyrhizobium japonicum E109, en medio LB y EMA respectivamente. De cada cultivo, y de una mezcla de ambos (en relación 1:1) se realizaron aislamientos y recuentos por microgota en los medios LB con rojo congo (LBRC), EMA, TSA y el medio formulado en este trabajo denominado CLA (clean Azospirillum). Observamos que la utilización de glucosa como fuente de carbono y glutamato como fuente de nitrógeno permitieron el desarrollo y recuento de B. japonicum inhibiendo el crecimiento de A. brasilense. Cuando ambos microorganismos se mezclaron, se observó que Az39 desarrollo en medio LBRC, TSA y EMA pero no así en CLA. Por el contrario E109 creció preferentemente en medio EMA y CLA, pero fue incapaz de crecer en medios LBRC y TSA, aunque el desarrollo de E109 en medio CLA requirió de un tiempo adicional en comparación al medio EMA. Por otro lado, se obtuvieron resultados similares utilizando formulaciones mixtas a base de Pseudomonas fluorescens y Bacillus sp. y se analizó el comportamiento de otras cepas pertenecientes a diferentes especies del género Azospirillum. Esta metodología es una herramienta fundamental para el recuento diferenciado de microorganismos que se utilizan rutinariamente en la formulación de inoculantes mixtos.