Evaluación del efecto del medio de cultivo sobre la tolerancia a la luz de Azospirillum brasilense Az39.

MOLINA, ROMINA; MONZÓN, LAURA; GUALPA, JOSÉ; CASSÁN, FABRICIO

Buenos Aires

Congreso; III Congreso de Microbiología Agrícola y Ambiental.; 2015

Asociación Argentina de Microbiología

La luz es una señal esencial que controla el crecimiento, desarrollo y comportamiento de muchos seres vivos, pero al mismo tiempo se considera una amenaza para la supervivencia de ciertos organismos aeróbicos debido a su capacidad fotooxidativa. El descubrimiento de proteínas fotorreceptoras en bacterias no fotosintéticas y su relación con el estilo de vida de tales organismos es un campo de estudio fértil dentro de la fotobiología. Trabajos previos de nuestro laboratorio confirman in sílico la presencia de ciertas proteínas fotorreceptoras en el genoma de A. brasilense Az39. Por otro lado, sabemos que la exposición de Az39 a la luz blanca o azul, tiene un fuerte efecto inhibitorio sobre el crecimiento de esta bacteria. A pesar de toda la información disponible sobre este género bacteriano, sabemos muy poco sobre la capacidad de Az39 para adaptarse a las condiciones de luz y su relación con el estilo de vida rizosférico o la capacidad de promover el crecimiento vegetal. A partir de esto, se planteó como objetivo de este trabajo, evaluar si el efecto inhibitorio de la luz blanca o azul podría depender de la fuente nutricional en el que A. brasilense Az39 se desarrolla. Para ello, cultivos puros de Az39 fueron mantenidos hasta fase exponencial de crecimiento en medio mínimo (MMAB) o rico (LB) y una vez alcanzada esta fase de desarrollo, correspondiente a una DO595=1.0-1.2, se realizaron diluciones decimales hasta alcanzar una de 10-7 de las que se sembraron 4 alícuotas de 20 μl (diluciones 10-5, 10-6 y 10-7) en placas de Petri conteniendo medio MMAB con y sin adición de 15g.L-1 del indicador Rojo Congo y modificado por la adición de 25%, 30%, 35%, 40%, 45% y 50% (v/v) de medio LB, para su posterior recuento a través de la técnica de microgota. Las placas se incubaron de forma invertida a 36±2°C durante 72 h en las siguientes condiciones: oscuridad; luz de día (60 w) y luz azul (PAR 38). Finalizado este período, se determinó la viabilidad celular [ufc.ml-1] y se hizo un análisis de morfología de colonias en cada tratamiento. Nuestros resultados indican que en condiciones de cultivo en medio mínimo modificado por la adición de LB entre 25-45% y bajo exposición a luz blanca, existió un dimorfismo entre colonias lisas (L) y rugosas (R) en una relación numérica aproximada de 2:1; mientras que en el medio modificado con el 50%, las colonias se observaron en su totalidad del tipo R (borde irregular, secas y radiadas). Por otro lado, en placas incubadas bajo exposición a luz azul PAR38, solo se observó el desarrollo de colonias tipo L (borde regular, mucosas y de morfología uniforme). Estos resultados nos indican que encondiciones de baja disponibilidad de nutrientes la bacteria cambia la morfología de sus colonias, modificando su tolerancia a la luz, lo que tendría una co-relación con la síntesis de componentes extracelulares.