Análisis de nodulación de soja y uso de un inoculante patrón en invernadero para determinar la calidad de productos comerciales

MASSA, ROSANA; FERRETI, MARTIN; PENNA, CLAUDIO; CASSÁN, FABRICIO

Córdoba

Jornada; XV Jornadas Argentinas de Microbiología. Adelantos en el diagnóstico Microbiológico.; 2014

Asociación Argentina de Microbiología

Una de las mayores dificultades para el desarrollo, registro, fiscalización y control de calidad de inoculantes, es la imposibilidad de contar con parámetros confiables y reproducibles que definan las propiedades y características de los mismos.Durante años se ha utilizado el recuento de nódulos, o el porcentaje de plantas noduladas como metodología para evaluar  inoculantes formulados con rizobios. Sin embargo, la variabilidad y la poca sensibilidad de tales métodos, no permite discriminar diferencias en la calidad de los productos, ni establecer parámetros de referencia.En comunicaciones anteriores hemos propuesto nuevos parámetros de evaluación de inoculantes para la recuperación de bacterias viables sobre semilla y la utilización de un inoculante patrón para este tipo de ensayos.El objetivo de este trabajo es presentar una nueva metodología de evaluación de la nodulación que permite discriminar diferencias en la calidad de los productos analizados, definir parámetros de referencia y consolidar el uso del inoculante patrón en condiciones de invernadero.La metodología incluye el uso de una mezcla del sustrato perlita:arena (3:1 v/v) estéril.y riego con solución de Hoagland estéril (10% v/v) sin nitrógeno. La iluminación es artificial del tipo led con un fotoperiodo de 16 hs de luz (aprox 10000 lux) a 30°C y 8 hs de oscuridad a 20°C. Cada tratamiento cuenta con un n = 27 plantas. Los ensayos se realizan en vasos plásticos nuevos de 300 ml de capacidad. Se siembran 3 semillas en cada uno de ellos. Luego de la emergencia, se deja sólo una planta por vaso. Durante el crecimiento de las plantas se realiza la medición del índice de verdor (SPAD) en la hoja central del segundo trifolio. El análisis de la nodulación es por recuento y peso húmedo de los nódulos del cilindro (2,5 cm x 2,5cm), discriminando entre los de raíz primaria y secundaria.Para esta metodología se define como inoculante patrón un inoculante formulado con Bradyrhizobium japonicum SEMIA 5079, en caldo YEM modificado por la adición de 1,5 g/l de glutamato monosódico con un rango de uso entre los 15-30 días desde la fermentación y una concentración de 1.109 UFC/ml.El comportamiento a nivel de la relación entre la nodulación y el índice SPAD de plantas tratadas con el inoculante patrón y el inoculante analizado se diferencian entre sí y con el control sin inocular. En todos los casos el mayor índice de verdor correlaciona con un mayor tamaño de nódulos en raíz primaria. A la inversa, la nodulación se compensa con mayor número de nódulos de menor tamaño en raíz secundaria.La metodología propuesta permite detectar diferencias entre los comportamientos de diferentes formulaciones y correlacionarlas con recuentos sobre semilla. La utilización de un inoculante patrón permite comparar el comportamiento de diferentes formulaciones de inoculantes a nivel del establecimiento de la simbiosis y dinámica de nitrógeno en plantas de soja.