Estudio de las proteínas de larvas de Rachiplusia nu infectadas con baculovirus recombinante a través de geles 2-D para el desarrollo racional de procesos de purificación de proteínas recombinantes

TARGOVNIK, ALEXANDRA M.; ARREGUI, MARIANA B.; FOGAR, MARIELA N.; WOLMAN, FEDERICO J.; CASCONE, OSVALDO; MIRANDA, MARÍA V.

Buenos Aires

Congreso; XI Congreso Argentino de Virología y II Congreso Latinoamericano de Virología; 2015

Sociedad Argentina de Virología

La expresión de proteínas recombinantes en el sistema baculovirus/células de insecto es cada vez más utilizado. Para aquellos productos que notienen alto valor de mercado, cabe la posibilidad de utilizar directamente los insectos vivos como biofábricas. Las especies susceptibles abaculovirus pertenecen a la familia Noctuidae que corresponden a mariposas de hábitos nocturnos como ser Rachiplusia nu. El sistema estálimitado para su utilización en la producción de proteínas de interés comercial dado el escaso conocimiento sobre el downstream processing deproteínas recombinantes a partir de extractos larvales. Cuando se trata con muestras complejas como en este caso, es crítico el diseño deesquemas de purificación que involucren un número reducido de etapas y establecer las condiciones óptimas de cada una de ellas para lograr unalto grado de purificación y rendimiento del producto. Cuando se trata de establecer métodos generales en sistemas no estudiados enprofundidad, es necesario describir el proteoma del huésped (proteínas contaminantes del proceso).Los objetivos de este trabajo son analizar a través de geles 2-DE, el perfil proteico y las características fisicoquímicas de las proteínaspertenecientes a los extractos larvales no infectados e infectados con baculovirus recombinante, con el fin de identificar los principalescontaminantes y describir el perfil cromatográfico de las proteínas del huésped de expresión utilizando diferentes matrices de intercambio aniónico.