INVESTIGADORES
BRIAND Laura Estefania
congresos y reuniones científicas
Título:
Investigación de la estructura y actividad proteolítica de papaína en medios acuosos orgánicos homogéneos a distintas temperaturas
Autor/es:
CARLOS R. LLERENA-SUSTER; CARLA JOSÉ; SEBASTIAÌN E. COLLINS; LAURA E. BRIAND; SUSANA R. MORCELLE DEL VALLE
Lugar:
La Plata
Reunión:
Encuentro; V Encuentro Regional de Biocatálisis y Biotransformaciones V EnReBB; 2012
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Biocatálisis y Biotransformaciones SAByB
Resumen:
Se estudió la estabilidad de papaína en mezclas acuoso-orgánicas mediante determinaciones de actividad residual y distintos análisis espectroscópicos (fluorescencia y FTIR-ATR). Los sistemas investigados contenían acetonitrilo (ACN), metanol (MeOH) y dimetilformamida (DMF) con 1 ó 10% (V/V) de buffer acuoso (pH 8,0). Se evidenció que, en presencia de ACN, la papaína retiene prácticamente toda su actividad catalítica luego de 24 h. de incubación a 298 K y que, al mismo tiempo, adquiere una conformación más compacta. En MeOH, en cambio, la papaína sufrió una importante pérdida de actividad (80%) después de 24 h de incubación a 298 K, pero no se observaron cambios importantes en su estructura secundaria. Esto sugiere que los cambios se localizaron cerca del sitio activo. En DMF se observó una pérdida total de actividad, comprobándose la aparición de cambios irreversibles en su estructura mediante espectros de fluorescencia, y un incremento moderado en las estructuras lámina beta, evidenciados mediante los análisis por FTIR-ATR. En todos los casos se observó que los solventes orgánicos produjeron una estructura más rígida y compacta en la papaína. Estas modificaciones afectarían el sitio activo en los casos de MeOH y DMF.
