EFECTO DE LOS COMPUESTOS TIÓLICOS SOBRE EL DAÑO AL ADN Y CROMOSÓMICO INDUCIDO POR BLEOMICINA EN CÉLULAS HUMANAS

MIRA, A.; GIMÉNEZ, E.M.; BOLZÁN, A.D.; BIANCHI, M.S.; LÓPEZ-LARRAZA, D.M.

Mendoza, Mendoza, Argentina

Congreso; VI Congreso Latinoamericano de Mutagénesis, Carcinogénesis y Teratogénesis Ambiental – XIV Congreso Argentino de Toxicología – XXIV Jornadas Interdisciplinarias de Toxicología,; 2005

Asociación Latinoamericana de Mutagénesis, Carcinogénesis y Teratogénesis Ambiental – Asociación Toxicológica Argentina

Se estudió el efecto de compuestos tiólicos (antioxidantes) sobre el daño inducido por bleomicina (BLM) en el ADN y cromosomas de células humanas linfoblastoideas. Los tioles Beta-mercaptoetanol (carga 0) (BME, 10mM), Glutatión (carga -) (GSH, 10mM), Cisteína (carga 0) (CYST, 10mM), Cisteamina (carga +) (CSM, 0,5-10mM) y Ditiotreitol (carga 0) (DTT, 0,5-10mM), se agregaron 30 minutos antes o inmediatamente después del tratamiento con BLM (100-500 µg/ml). La adición previa de BME, GSH y CYST produjo una disminución del daño cromosómico inducido por BLM, mientras que la CSM y el DTT lo potenció. La adición de BME y GSH con posterioridad al tratamiento con BLM no tuvo efecto significativo sobre el daño cromosómico, mientras que los restantes tioles potenciaron la acción clastogénica de la BLM. El análisis de las rupturas de ADN de cadena simple (cs) y doble (cd) mostró que todos los tioles potenciaron el daño, tanto en los tratamientos previos como en los posteriores. que fue, de menor a mayor, GSH-BME-CYST-CSM-DTT. Los tioles pueden provocar tres fenómenos: a) reducción de la desoxirribosa oxidada por los radicales libres generados por la BLM (reparación química), b) neutralización de radicales libres generados por la BLM y c) reducción del hierro que forma parte del complejo activo de la BLM. El proceso "c" sería el más importante. Una vez que el hierro del complejo de la BLM es oxidado, se generan los radicales libres del oxígeno que dañan el ADN. La reducción del hierro  (de +3 a +2) por los tioles reactivaría el proceso de daño. La reducción del daño cromosómico que brindarían el GSH, el BME y la CYST se debería a reparación enzimática de las rupturas de ADNcd ocurrida durante las 24 hs en las que las células permanecen en cultivo en los ensayos citogenéticos. Esta reparación sería sobrepasada por la citotoxicidad inducida por la CSM y el DTT. Ensayos preliminares de reparación de rupturas de ADNcd a las 12 y 24 hs, y de citotoxicidad confirman esta hipótesis.