La exclusión de AMPc a través de MRP4 es necesaria para la capacitación espermática en bovinos: Contribución de los receptores A1 purinérgicos

CLAUDIA OSYCKA SALUT; FEDERICO DIEZ; JIMENA BURDET; MARIA GRACIA GERVASI; ANA MARÍA FRANCHI; LILIANA G. BIANCIOTTI; CARLOS A. DAVIO; SILVINA PEREZ MARTINEZ

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología y Reunión Anual de la Sociedad de Farmacología Experimental.; 2013

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

(246) LA EXCLUSIÓN DE AMPc A TRAVÉS DE MRP4 ES NECESARIA PARA LA CAPACITACIÓN ESPERMÁTICA EN BOVINOS: CONTRIBUCIÓN DE LOS RECEPTORES DE A1 PURINÉRGICOS (A1R) Osycka-Salut C.1; Diez F.2; Burdet J.1; Gracia Gervasi M.1;Franchi A.3; Bianciotti L.4; Davio C.2; Pérez-Martinez S.1 Laboratorio de Biología de La Reproducción en Mamíferos,Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos (CEFYBO)-CONICET, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina1 Laboratorio de Farmacología de Receptores, Departamento de Farmacología, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina2; Laboratorio de Fisiopatología de la Preñez y el Parto, Centro de Estudios Farmacológicos y Botánicos (CEFYBO)-CONICET,Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina3; Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo (INIGEM)-CONICET, Cátedra de Fisiopatología, Departamento de Ciencias Biológicas, Facultad de Farmacia y Bioquímica, Universidad de Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina4. La capacitación espermática se correlaciona con cambios estructurales y bioquímicos en el espermatozoide (ESP) que involucra, entre otros, un incremento en los niveles de AMPc. A su vez, en otros tipos celulares, tanto en condiciones fisiológicas y patológicas el AMPc es excluído por proteínas de resistencia a multidrogas (MRPs), en particular MRP4, regulando la homeostasis celular. El objetivo del trabajo fue estudiar la participación del proceso de exclusión de AMPc, vía MPR4, en el proceso de capacitación inducida por bicarbonato en bovinos. Se realizaron experimentos de capacitación in vitro de ESP bovinos criopreservados incubados con bicarbonato 40 y 70 mM, probenecid (inhibidor de MRPs), y DPCPX (antagonista de A1R). La evaluación de la capacitación fue realizada mediante las técnicas de clorotetraciclina y de inducción de la reacción acrosomal por lisofosfatidilcolina analizada con la lectina PSA acoplada a FITC. Los niveles intra y extracelulares de AMPc fueron detectados mediante un ensayo de unión a PKA y posterior determinación de AMPc. La incubación de los ESP con bicarbonato 40 y 70mM incrementó el patrón capacitado de los ESP y los niveles de AMPc tanto a nivel intracelular como extracelular (p