Efecto del congelamiento (-80°C) de diferentes especies de Pleurotus de interés comercial sobre granos estériles con y sin crioprotectores para su preservación a largo plazo.

RAMIREZ S N; LINING D; GANUZA, M; POSE G.; ALBERTÓ E.

Jornada; I Jornadas Científicas del INTECH; 2023

Se han utilizado diferentes métodos de preservación para los basidiomicetes. Para su conservación a largo plazo la crio-preservación sería la técnica más adecuada. Sin embargo, la respuesta a la ultracongelación puede variar para diferentes especies, y hay muy poca información al respecto. El principal objetivo de este estudio es evaluar el efecto de la congelación a -80°C de diferentes especies de Pleurotus, La metodología propuesta consiste en crio-conservar (-80ºC) el micelio crecido sobre granos de sorgo ya que es una técnica rápida y accesible. Las especies estudiadas en este trabajo fueron P. colombinus, P. citrinopileatus y P. djamour, este último, particularmente sensible a la conservación a largo plazo por técnicas más convencionales (Ej. repiques sucesivos). Las cepas fueron repicadas y pre-cultivadas por 7 días en agar Papa Dextrosa (PDA). Se inocularon granos de sorgo (Sorghum vulgare) hidratados y estériles (bolsa 500g) con trozos de micelios y se incubó en oscuridad a 25ºC por 10 días aproximadamente. Los granos con micelio se guardaron en viales en diferentes condiciones, granos solos, granos en solución de glicerol al 10% y granos en solución de sacarosa al 10% como crioprotectores, y puestos directamente a -80ºC por 7 días. Luego, dos viales de cada condición fueron descongelados en baño a 30°C, 48 semillas de cada condición fueron inoculadas en placas con PDA para evaluar viabilidad y crecimiento radial hasta completar la placa. Se realizó un control llevando el mismo procedimiento, pero sin congelar. P. colombinus y P. djamour mostraron una recuperación de viabilidad del 100% en 24 hs y crecimiento radial completo en 9 días en todas las condiciones de conservación luego del descongelamiento. P. citrinopileatus mostró recuperación a las 48hs, crecimiento radial completo en 13 días en granos solos y en sacarosa y 16 días en granos con solución de glicerol. Los controles, mostraron 100% de recuperación en 24 hs. Estos resultados muestran que ésta puede ser una técnica viable para la conservación de basidiomicetes a largo plazo, siendo también estudiada sobre especies de Agaricus (Mata et al. 2014), P. pulmonarius y Ganoderma lucidum. Estudios a largo plazo (1,3 y 5 años de mantenimiento a -80°C) se están realizando sobre estas especies y otras de interés.