Las especies reactivas del oxígeno son mediadoras de la activación del cotransportador Na+/HCO3- cardíaco inducida por angiotensina II

DE GIUSTI VC; AIELLO EA

Mar del Plata

Congreso; Congreso de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS). LIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2008

Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS)

El intercambiador Na+/H+ (NHE) junto al cotransportador Na+/HCO3- (NBC) restablecen el pH intracelular (pHi) ante situaciones que llevan a la acidificación celular cardíaca. La Angiotensina II (AngII) es una hormona fuertemente implicada en la fisiopatología cardíaca. Su papel en la activación del NHE es ampliamente aceptado. Por otra parte, nosotros demostramos recientemente que las especies reactivas del oxígeno (ROS) actúan como mediadores en la señalización intracelular del efecto inotrópico positivo de la AngII y la endotelina-1. El objetivo del presente trabajo fue dilucidar el rol de la AngII y los ROS en la recuperación del pHi mediada por el NBC. La actividad del NBC se estudió mediante epifluorescencia en miocitos de gato cargados con BCECF. Se realizaron pulsos de amonio en un medio con bicarbonato y la recuperación de la acidosis se ajustó a una curva exponencial a partir de la cual se calculó el flujo de protones (Jh) a pH 6.8. Los experimentos se realizaron en presencia de HOE642 10 mM, inhibidor del NHE. El JH control fue 1.06±0.15 mM/min, n= 9. El agregado de AngII 100 nM al medio aumentó el Jh a 1.70±0.18 mM/min, n=6; p<0.05. La activación inducida por AngII quedó abolida cuando las células se preincubaron con celeritrina 2 mM, bloqueante de la PKC (Jh 0.76±0.15 mM/min, n=10; p<0.05), con U0126 10 mM, inhibidor de la MAP quinasa ERK (Jh 0.73±0.15 mM/min, n=5; p<0.05), con MPG 2 mM, secuestrador de los ROS (Jh 0.83±0.09 mM/min, n=9; p<0.05) ó con Apocinina 300 mM, inhibidor de la NADPH oxidasa (Jh 1.16±0.21 mM/min, n=5; p<0.05). Ninguna de las drogas empleadas afectó significativamente el JH basal. El efecto de AngII fue mimetizado por el agregado de H2O2 100 mM al medio (Jh 1.59±0.24 mM/min, n=8). Los resultados nos permiten concluir que la AngII estimula al NBC mediante la generación de ROS por la NADPH oxidasa y la activación de PKC y ERK, representando un mecanismo relevante ante la acidosis producida por situaciones fisiológicas y/o patológicas.