Lactógeno placentario ovino y Prolactina ovina: digestión proteolítica parcial y estabilidad conformacional. Comunicación Oral

FERNÁNDEZ, M.L.; CURTO M.; CYMES, G.; WOLFENSTEIN-TODEL, C.

Córdoba

Congreso; XXXV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Bioquímica y Biología Molecular; 1999

El lactógeno placentario ovino (oPL) y la prolactina ovina (oPRL) pertenecen a la familia que incluye a la hormona de crecimiento humana (hGH) por lo cual se cree que poseen el mimo motivo estructural de 4 a-hélices antiparalelas (four-helix-bundle). La estructura tridimensional de ambas hormonas, no aún determinada, fue estudiada por digestión proteolítica parcial con la proteasa V8. Se analizaron los fragmentos obtenidos a partir del oPL, demostrando un sitio de clivaje en la tercera hélice. Estos datos sugieren que esta hélice se encuentra parcialmente desorganizada en este punto. Los fragmentos restantes son compatibles con un plegamiento similar para oPL y hGH sobre la estructura cristalina de esta última. En el caso de la oPRL se observaron rupturas proteolíticas al final de la primera hélice y al comienzo de la segunda, sugiriendo que éstas serían más cortas que en la hGH. Para conocer más en detalle las posibles diferencias entre los distintos miembros de esta familia, se realizaron determinaciones de dicroísmo circular y fluorescencia intrínseca para examinar el efecto de agentes desnaturalizantes sobre el oPL y la oPRL. El desplegamiento causado por  la exposición de ambas hormonas a guanidina 6M revirtió completamente al ser eliminado el desnaturalizante. En cambio la exposición a pH 3.0 causó una disminución irreversible del contenido de a-hélice en ambas hormonas, especialmente el oPL, indicando que esta hormona es menos estable que la oPRL o hGH.