INVESTIGADORES
PODEROSO Juan Jose
congresos y reuniones científicas
Título:
Regulación génica de óxido nítrico sintasa mitocondrial (mTNOS) y su regulación con la nitración del complejo I en el hipotiroidismo.
Autor/es:
FRANCO MC; PERALTA J; ANTICO ARCIUCH V; PODEROSO JJ; CARRERAS MC
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004
Institución organizadora:
SAIC, SAI, SAFE, SABiología, SABiofísica, SAN, SAF
Resumen:
Las variaciones del estado tiroideo son seguidas por cambios en la actividad mitocondrial y en el consumo de oxígeno. Previamente, observamos en el hipotiroidismo un aumento de la expresión de NOS neuronal (nNOS), su translocación a mitocondria (mtNOS), nitración de proteínas mitocondriales y activación diferencial de MAPKs. Con el propósito de modular experimentalmente los efectos de mtNOS, ratas Wistar machos fueron divididas en 4 grupos, cada uno con n=4-8: control (C), hipotiroideo (Hipo) (metimazol 0.02%, 4 sem, vía oral), Hipo + L-NAME (Hipo + 0.75 mg L-NAME/ml, 3 sem, vía oral) e Hipo + T3 (hipotiroideas + 15 µg T3/kg peso/día, IP por 3 días). El consumo de oxígeno sistémico disminuyó en Hipo pero fue reestablecido por T3 o L-NAME (ml/ kg(0.75).min) (C: 16.0 ± 0.1; Hipo: 11.0 ± 0.4*; Hipo + L-NAME: 14.9 ± 0.5*, Hipo + T3: 17.8 ± 0.2; *p<0.05). En hipotiroidismo se apreció un aumento de la transcripción de nNOS alfa. En esta condición, la nitración de proteínas mitocondriales fue evidente en el Complejo I (por Blue Native PAGE), que además exhibió una disminución de 62% en su actividad; L-NAME previno la disminución de la captación sistémica de O[2] y la nitración del Complejo I y preservó su función, sin modificar la expresión de mtNOS. La co-inmunoprecipitación con anticuerpos anti-subunidad de 39 kDa del complejo I, seguida de western blot revelado con anticuerpos específicos anti-nNOS mostró la asociación entre estas dos proteínas. Las conclusiones son: a) El aumento de la transcripción y traslocación de nNOS (mtNOS) en el hipotiroidismo conduce a un aumento en la nitración de proteínas del complejo I, por la formación de peroxinitrito b) existe una asociación de mtNOS a proteínas del Complejo I que favorece sus efectos; c) además de sus efectos vasculares, L-NAME puede atenuar los efectos de mtNOS sobre el metabolismo oxidativo.