Purificación de una forma latente de proteasa multicatalítica de músculo de pescado y distribución de la enzima en diferentes tejidos

BUSCONI L., FOLCO E.J.E., STUDDERT C.A., CASALONGUÉ C.A. Y SÁNCHEZ J.J.

Mar del Plata

Congreso; XXVI Reunión Anual de SAIB; 1990

Una forma latente de proteasa multicatalítica fue purificada a aparente homogeneidad a partir de músculo de corvina por cromatografías en DEAE-Sephacel, MonoQ, Sephacryl S-300 y segunda MonoQ. La preparación fue electroforética e inmunológicamente similar a la enzima previamente purificada de la misma fuente por un método diferente, pero mostró mucha menor actividad  tipo quimotripsina y tipo tripsina.. Dichas actividades respondieron a tratamientos con SDS, urea y calor en formas diferentes: SDS estimuló ambas actividades, urea estimuló la primera e inhibió la segunda, y el calentamiento estimuló la primera sin afectar la segunda. La estimulación de la actividad tipo quimotripsina por los tres tratamientos fue irreversible. La exposición de la enzima a urea o SDS en ausencia de sustrato causó una rápida inactivación, mientras que la activación por calor tuvo lugar en ausencia o presencia de sustrato. En presencia de urea no se observó el efecto estimulante del SDS sobre la actividad tipo quimotripsina. Estos resultados sugieren que la enzima puede ser activada por diferentes mecanismos. Se encontró proteasa multicatalítica con similar inmunorreactividad en diferentes tejidos de corvine. Se evaluó el contenido de enzima por inmunoensayo. El nivel de enzima fue mucho mayor en gónadas que en los otros tejidos, sugiriendo para la proteasa multicatalítica un importante rol en el proceso de desarrollo embrionario.