Expresión de sacarosa-fosfato sintasa en trigo

ZABALETA EJ, CRESPI M, STUDDERT CA,AND SALERNO G.

Buenos Aires

Congreso; XXV Reunión Anual de SAIB; 1989

La enzima sacarosa fosfato sintasa (SPS) cataliza la siguiente reacción: Fru-6-P + UDP-Glc --- Sac-6P + UDP. La sacarosa-6P se trqansforma en sacarosa como connsecuencia de la actividad de la sacarosa fosfato fosfatasa (SPP). En nuestro laboratorio se ha purificado la enzima SPS a partir de germen de trigo y se han obtenido anticuerpos específicos con los que se ha tamizado una biblioteca de cDNA de hojas de trigo, obteniéndose un clon de cDNA de 600 bp. Con dichos anticuerpos y con el clon de cDNA se ha seguido la expression de la proteína por medio de Western y Northern blots en diferentes tejidos y en plantas bajo diferentes condiciones. Así vimos que los péptidos que se revelan en muestras de grano (55 y 35 kD) se encuentran preferentemente en el embrión y coinciden con los purificados a partir de germen. En cambio, en hoja se revela un péptido principal de 90 kD. Un péptido de igual peso molecular se muestra más abundante en hoja etiolada, el cual disminuye tras 48 hs de exposición a la luz. En raíz de plantas crecidas a 23 ºC no se detectaba señal con los anticuerpos, pero cuando las plantas eran pasadas a 4 ºC fue posible detectar el péptido de 90 kD. El mensajero detectado en ensayos de Northern blot es de 28 kD y su patrón de expresión se correlaciona con el observado para el péptido. Por otra parte, se ha comenzado a estudiar la estructura del gen. Los primeros resultados indicarían que se trata o bien de un gen de única copia o de muy bajo número de copias..