Estudio proteómico para mejorar el reactivo PPD-B utilizado en el diagnóstico de tuberculosis bovina: producción de nuevas mezclas enriquecidas con los componentes más antigénicos de la PPD-B

MON, MARIA LAURA; MOYANO, DAMIÁN; VIALE, MARIANA; COLOMBATTI, ALEJANDRA; GAMIETEA, IGNACIO; ALONSO, BERNARDO; SANTANGELO, MARÍA DE LA PAZ; ROMANO, MARÌA ISABEL

revista argentina de zoonosis y enfermedades infecciosas emergentes

Asociacion Argentina de zoonosis

Año: 2015 vol. X p. 15 - 19

1851-3638

La reacción de hipersensibilidad retardada (DTH) producida por la aplicación intradérmica del derivado proteico purificado de una cepa de M. bovis (PPD-B) y la prueba que mide liberación de interferon-gamma (IFN-) son usadas para el diagnóstico de tuberculosis bovina (TBB). La especificidad de estas pruebas puede verse comprometida si se utiliza PPD-B, debido a reaccionantes positivos por sensibilización con otras micobacterias. En el presente estudio evaluamos dichas pruebas con dos mezclas conteniendo proteínas recombinantes de M. bovis: Mezcla 1 (M1): con ESAT-6, CFP-10 y MPB83; y mezcla 2 (M2): con ESAT-6, CFP-10, MPB83, HspX, TB10:3 y MPB70. Las mezclas M1, M2 y PPD-B aplicadas intradérmicamente en cobayos sensibilizados con M. bovis mostraron respuestas similares. Sin embargo, M1 indujo una respuesta significativamente menor que la PPD-B en cobayos sensibilizados con M. avium. En bovinos, utilizando M1 en la prueba de IFN- se obtuvo mayor especificidad que con PPD-B o M2, dado que M1 detectó animales infectados con M. bovis, con mínima detección de animales con paratuberculosis o experimentalmente vacunados con BCG. Para optimizar estas mezclas, se obtuvieron diferentes fracciones de las PPD-B y en las fracciones más inmunogénicas se identificaron 7 proteínas: MPB70, MPB83, CFP10, CFP2, FixB, PepA, HspX. Al utilizar M1 con FixB en la prueba de IFN- aumentó el reconocimiento de animales en un rodeo con TBB, sin detectar animales en un rodeo con paratuberculosis. Nuestros resultados demuestran que esta nueva mezcla antigénica utilizada en el test que mide liberación de IFN- permite detectar específicamente animales con TBB, mientras que el reactivo PPD-B detecta animales infectados con otras micobacterias.