Antiacanthaína un nuevo biocatalizador de la síntesis enzimática del tetrapéptido (Z-Tyr-(Leu)2 Leu-OH), en medios no convencionales

GRISEL BERSI.; SONIA BARBERIS. ; ANA MARÍA CANTERA.; DIEGO VALLÉS.

San Luis

Simposio; III Simposio Latinoamericano de Biocatálisis y Biotransformaciones (SILaByB). San Luis; 2018

Sociedad Argentina de Biocatálisis y Biotransformaciones

El principal interés en la biocatálisis en fase no acuosa, se ha centrado en la especificidad de las enzimas, la transformación de sustratos inestables o poco solubles en agua y en la ausencia de contaminación bacteriana [1]. Estas características son muy importantes para utilizar proteasas como catalizadores en la síntesis de péptidos bioactivos [2]. El objetivo de este trabajo fue estudiar la síntesis del tetrapéptido N-α-CBZ-Tyr-(Leu)2Leu-OH (Z-YLLL), utilizando el extracto proteolítico pre-purificado de Bromelia antiacantha Bertol, como un nuevo biocatalizador de dicha reacción de síntesis. Se estudió la estabilidad de la enzima en diferentes sistemas acuoso-orgánicos, y se seleccionó el más promisorio para la reacción de síntesis. En base a las preferencias del biocatalizador por sustratos aminoacídicos sintéticos (N-α-CBZ-Aminoácido-p nitrofenil éster), se seleccionó el sustrato limitante (donador de acilo) y un dipéptido modelo a partir de BIOPEP (2012) conteniendo dicho sustrato (Tyr-Leu-OH). Se ensayó la síntesis bajo control cinético y termodinámico en un sistema formado por 30%(v/v) de metanol y buffer Tris-HCl 0,1M (pH 9), a 40ºC y 200rpm. Se obtuvo un producto con tR: 15,03 min, con un rendimiento de 86,5%, que se purificó utilizando columnas C18 Sephak y se analizó por MS, correspondiendo a Z-YLLL (m/z: 654,85). Cuando el donador de acilo no estaba activado la síntesis no procedió. Este trabajo demostró que el extracto proteolítico pre-purificado de Bromelia antiacantha Bertol., es un promisorio biocatalizador para la síntesis enzimática de péptidos bioactivos en medios acuoso-orgánicos. Referencias.- 1. Shihui, W.; Xianghe, M.; Hua, Z.; Yang, L.; Secundo, F.; L. Yun. Catalysts. 2016,32, 1-16.- 2. Barberis, S.E.; Origone, A.L; Adaro, M.O.; Bersi, G. Handbook of Food Bioengeering. Role of Materials Science in Food Bioengineering. 2018, 5, 147-174.