Evidencias de una alta conductancia al calcio a través de la policistina-2.

2012 MR CANTERO, PL PÉREZ, AM ROSSI, BC GUTIÉRREZ, V RODRÍGUEZ, HF CANTIELLO.

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología.; 2012

La policistina-2 (PC2, TRPP2) es un canal iónico perteneciente a la superfamilia TRP (transient receptor potencial), que es codificada por el gen PKD2, cuyas mutaciones son causantes de la poliquistosis renal autosómica dominante. Trabajos previos de nuestro laboratorio demostraron que la PC2 está altamente expresada en el sinciciotrofoblasto (STh) de la placenta humana a término, donde mediaría la transferencia del Ca2+ materno-fetal. Una de las principales funciones de la PC2 como canal iónico es el transporte del catión divalente Ca2+ y su interacción con el mismo. Sin embargo, no existen datos experimentales acerca de dicho transporte, particularmente a concentraciones fisiológicas de este catión. En el presente trabajo se exploró el transporte de Ca2+ a través de la PC2 de dos preparaciones diferentes, la proteína producida como producto de traslación in vitro (PTV) y la proveniente de vesículas apicales enriquecidas del STh, con abundante PC2 endógena (González-Perrett y cols 2001). Las corrientes de canal único permeable al Ca2+ se determinaron mediante la reconstitución de PC2 en un sistema de bicapas lipídicas, tanto en presencia de gradientes químicos y/o biiónicos de Ca2+ y Ca2+ versus K+, respectivamente. Los datos experimentales obtenidos de las curvas corriente-voltaje permitieron calcular la conductancia al Ca2+ de la PC2, que se interpretó mediante modelos basados en las teorías de campo constante de Goldman-Hodgkin-Katz y de velocidades absolutas para los dos cationes (K+ y Ca2+). La conductancia máxima obtenida en condiciones de gradiente biiónico de K+ 150 mM (cis) vs. K+ 15 mM más Ca2+ 90 mM (trans) fue de 16,9 pS, para el transporte de Ca2+ a potenciales negativos. El potencial de reversión (Vrev) en estas condiciones permitió calcular la perm-selectividad catiónica divalente/monovalente. Estos datos experimentales fueron comparados con los obtenidos con la PTV en gradiente monoiónico de Ca2+. La medición experimental de las corrientes de Ca2+ en presencia de Ca2+ 100 mM (cis) y 10 mM (trans), fueron consistentes con conductancias máximas de 159 pS a potenciales positivos altos, y de 12 pS a potenciales negativos, respectivamente. El Vrev obtenido de la relación corriente-voltaje fue de -30 mV, consistente con una alta selectividad catiónica. Los datos experimentales y su interpretación teórica son consistentes con una alta permeabilidad catiónica al Ca2+ por parte de la PC2, confirmado por corrientes medibles de Ca2+, que fueron validadas en forma teórica por los cálculos de su transporte en la PC2 del STh, donde este canal tendría un papel fundamental en la transferencia de Ca2+ materno fetal.