La interacción óxido nítrico/deformación mecánica celular serían factores determinantes en el mecanismo de remodelado cardiovascular propio de la hipertensión arterial

LUCIANA MAZZEI; WALTER MANUCHA; NEIL G. DOCHERTY

CABA

Congreso; 38º Reunión anual del consejo argentino de hipertensión arterial; 2017

Consejo Argentino de Hipertensión Arterial

El remodelado cardiovascular se produce en respuesta a sobrecarga hemodinámica en condiciones fisiológicas y patológicas. Sin embargo, no se ha resuelto aún si la estimulación primaria es la deformación mecánica, los factores neurohumorales o incluso la interacción de ambos. Dichos componentes se traducen en alteraciones bioquímicas con mensajeros citosólicos y nucleares regulando la transcripción de genes que finalmente modulan el remodelado. Recientemente, el óxido nítrico (NO) ha surgido como un importante regulador del remodelado mediante su acción anti-hipertrófica. En este sentido, nuestro grupo ha demostrado a nivel renal el protagonismo de la proteína del tumor de Wilms (WT-1) y su vínculo con la proteína de choque térmico 70 (Hsp70) durante el desarrollo y mantenimiento de la hipertensión. Además, demostramos que el NO reduce la apoptosis inducida por deformación mecánica de células epiteliales tubulares renales normales de rata (NRK-52E) coincidiendo con la restauración de los niveles de expresión de WT-1 y Hsp70. WT-1 regula múltiples genes -destacándose el de renina- y resulta fundamental para el desarrollo y función de órganos vitales como riñón, corazón y vasos sanguíneos. Por lo expuesto, propusimos como objetivo central evaluar si existe interacción entre los niveles de NO y la deformación mecánica en cultivo de células de músculo liso vascular (CMLV) provenientes de ratas SHR; y segundo, comprobada dicha interacción, si la misma pudiera resultar clave en el mecanismo de remodelado cardiovascular. Para lo cual se emplearon cultivos primarios de CMLV (mesentéricas) de ratas SHR y WKY (machos N=8) de 10 semanas. Previo a la obtención de células, medimos la presión arterial sistólica en SHR (180 mmHg) y WKY (125 mmHg). Luego de alcanzada la confluencia celular (80%), se procedió a dividir los cultivos (SHR y WKY) en subgrupos sometidos o no a deformación mecánica -con equipo Flexcell- tratados o no con inhibidores e inductores del NO (L-NAME y L-Arginina). Se evaluó apoptosis por citometría de flujo, y en lisado celular: nitritos por Griess, mensajeros/proteínas (WT-1 y Hsp70) por PCR/WB. Verificamos en cultivos de SHR (bajos niveles de NO) un incremento significativo de la apoptosis con reducción de WT-1/Hsp70. Mientras que los provenientes de WKY (altos niveles de NO) manifestaron mínima apoptosis y mayores niveles de WT-1/Hsp70. De especial interés, los cultivos provenientes de ratas WKY sometidos a deformación mecánica no se diferenciaron de los provenientes de ratas SHR sin deformación mecánica. Mientras que los inhibidores del NO en cultivos de WKY sin deformación mecánica promovieron resultados equivalentes a las SHR. A la inversa, los cultivos de SHR sin deformación mecánica tratados con donantes de NO condicionaron resultados análogos a WKY. Por lo tanto, la biodisponibilidad del NO fue capaz de regular la apoptosis inducida por la deformación mecánica en células CMLV de SHR/WKY. Estos resultados apoyan un papel protector del NO en condiciones que implican estrés mecánico como el provocado por hipertensión arterial. Además, sugerimos un rol central del eje NO-Hsp70-WT-1 vinculado a la deformación mecánica y que en paralelo parece ejercer un efecto anti-apoptótico lo que podría condicionar el remodelado durante la hipertensión arterial.