Doxorrubicina modifica la metilación del gen CDKN2B y la expresión de la proteína p15 en células de cáncer de mama

LAURA C. GÓMEZ; MAYRA L. SOTTILE; SILVINA B NADIN; LAURA M. VARGAS-ROIG

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2015

Introducción: Doxorrubicina (Doxo) es una de las drogas de primera línea utilizadas en el tratamiento del cáncer de mama. En células MCF-7 resitentes a doxo, se han reportados cambios epigenéticosen genes relacionados con importantes mecanismos celulares. El hallazgo de marcadores moleculares que permitan predecir la respuesta a Doxo constituye un paso necesario para personalizar y optimizar el tratamiento. La metilación aberrante de Genes Supresores Tumorales (GSTs) se relaciona con la progresión tumoral y con la resistencia a drogas antineoplásicas. Basados en estos antecedentes nuestro objetivo consiste en determinar si Doxo modifica la metilación y/o expresión de GSTs en células tumorales mamarias. Metodología: se utilizaron líneas celulares de cáncer de mama MCF-7 y MDA-MB231. se realizó MS-MLPA (Methyl Specific-Multiplex Ligation Probe dependent Amplification) y Western Blot. Resultados: Se determinó el perfil de metilación de 36 GSTs de las mencionadas líneas celulalres. Cada línea celular se expuso durante 24 h con la dosis IC50 de Doxo determinada por ensayo clonogénico (MCF-7 IC50= 24,3 nM y MDA-MB231 IC50=22,2 nM). Finalizado el tratamiento, se determinó nuevamente el perfil de metilación de los 36 GSTs. En la línea celular MDA-MB231 no se observaron cambios en el perfil de metilación luego del tratamiento con Doxo. En la línea celular MCF-7, observamos que el gen CDKN2B que se encontraba moderadamente metilado (0.51) antes de la administración de Doxo, se desmetiló completamente por efecto de la droga. La expresión de la proteína p15 (codificada por el gen CDKN2B) aumentó luego del tratamiento con Doxo. Conclusión: la administración de Doxo en células MCF-7 disminuye la metilación del gen CDKN2B y aumenta la expresión de la proteína p15. Estudios moleculares combinados (epigenéticos y proteicos) podrían constituir novedosas herramientas que permitan al médico oncólogo personalizar el tratamiento antitumoral.