Rol citoprotector del óxido nítrico y HSP70 en la obstrucción ureteral unilateral neonatal

WALTER MANUCHA; PATRICIA G. VALLES

Centro de Convenciones “Patio de la Madera” Rosario Argentina

Congreso; XV Congreso Argentino de Nefrología. VIII Congreso Argentino para Técnicos y Enfermeros en Nefrología.; 2007

Sociedad Argentina de Nefrología

En nefropatía obstructiva neonatal, la inducción de la apoptosis en células tubulares conduce a la atrofia tubular y la pérdida de tejido renal. El óxido nítrico ha sido reportado como un regulador bifuncional de dicha apoptosis. Un rol citoprotector interfiriendo con el proceso de apoptosis ha sido atribuido a la  proteína de golpe de calor HSP70 Objetivo: Estudiar la probable interacción ON con HSP70 en la modulación de la vía mitcondrial apoptótica en OUU neonatal. Metodología: Experimentos in vivo e in vitro fueron realizados en ratas obstruídas a 48 hs de vida, nefrectomizadas luego de 5 y 14 días de obstrucción y en sus respectivos controles. In vitro, alícuotas de homogenatos de corteza fueron incubados en presencia de Nitroprusiato de sodio y L-NAME. En homogenatos de corteza se determinaron niveles de ON (Griess), expresión de óxido nítrico sintasa inducible (iNOS), procaspasa 3 y HSP70 (WB). Bax y BcL2 (RT-PCR, WB), actividad de caspasa 3 y NADPH oxidasa (Fluorescencia). Se realizó coinmunoprecipitación de BcL2 y HSP7. Resultados: La OUU crónica (14 días) demostró marcada apoptosis con significativo incremento en la actividad de caspasa 3 y NADPH oxidasa e índice apoptótico (p<0.01) y disminución de ON, de la expresión de BcL2 y deHSP70 (p<0.01) respecto al control. Contrariamente, al imponer exógenamente ON, fue demostrado incremento de expresión de HSP70 y de BcL2, además disminución de la actividad de caspasa 3 y NADPH oxidasa. Interacción de BcL2 y HSP70 en presencia de ON fue mostrada por coinmunoprecipitación. Durante el 5º día de OUU se demostró incremento de la expresión iNOS, HSP70 y niveles de ON con ausencia de apoptosis  Conclusiones: Los resultados nos permiten sugerir que en OUU la biodisponibilidad de ON modularía la expresión HSP70 suprimiendo señales apoptóticas con preservación y estabilización de BcL2 e inhibición de caspasa 3.