Efectos de la hipertermia en la expresión génica de proteínas de golpe de calor y en el daño al ADN inducido por cisplatino en células tumorales deficientes y no deficientes en HMLH1

SOTTILE M.L.; CIOCCA, D.R.; VARGAS ROIG, L.M.; NADIN, S.B.

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2011

La exposición a una hipertermia moderada induce la síntesis de proteínas de golpe de calor (HSPs). HSP27 y HSP70 son críticas para la proliferación y supervivencia celular y se han asociado con resistencia a drogas antineoplásicas como cisplatino (CPt). CPt produce uniones cruzadas en el ADN, reconocidas por el sistema de reparación ?Mismatch Repair? (MMR). Aún se desconoce si HSPs están vinculadas con el sistema MMR. Objetivo: Analizar la expresión a nivel de ARNm de HSP27, HSP72, HSF1, hMLH1 y hMSH2 y el daño al ADN inducido por hipertermia y/o CPt en líneas celulares de adenocarcinoma colorectal deficientes y no deficientes en sistema MMR (hMLH1). Métodos: Las líneas HCT116 y HCT116ch2 (MMR incompetente) y HCT116ch3 (MMR competente) fueron expuestas a: 1- Golpe de calor (GC) a 41 y 42°C (1 hora); 2- CPt, 10 microM (1 hora); 3- GC más CPt, 10 microM (1 hora) 24 horas después de un GC a 42°C (1 hora). Las células fueron recolectadas a tiempo 0, 4 y 24 hs después de los tratamientos. Se realizó qRT-PCR y alkaline comet assay. Resultados: La expresión constitutiva de HSP27 y HSP72 en HCT116ch3 fue significativamente mayor que en HCT116. Luego del GC, la transcripción de HSP27, HSP72 y HSF1 aumentó significativamente en todas las líneas celulares, siendo mayor en HCT116ch3. El GC incrementó la expresión de hMLH1 (P 0,001) y de hMSH2 (P 0,001) en HCT116ch3. CPt disminuyó la expresión de HSP27 en HCT116ch3. 24 hs después de GC más CPt, se observó un incremento en la expresón de HSF1 (P 0,001) y hMLH1 (P 0,001) en HCT116ch3, cuyos niveles fueron superiores a los de la  línea parental (P 0,001). El GC redujo un 30% la formación de aductos de CPt en HCT116ch3 (P 0,001). Conclusiones: la expresión de los genes HSP27, HSP72, HSF1, hMLH1 y hMSH2 se modifica en respuesta al estrés térmico en presencia de un sistema MMR deficiente. La hipertermioa modula la sensibilidad a CPt en células con un sistema MMR competente, lo cual sugiere su participación en la respuesta al estrés.