Obtención y caracterización de anticuerpos con Clostridium difficile

TREJO, FERNANDO; SERRADELL, MARÍA; PEREZ, PABLO; FOSSATI, ALBERTO; DE ANTONI, GRACIELA

Mendoza, Argentina

Congreso; XII Jornadas Argentinas de Microbiología - I Jornadas Conjuntas de Microbiología, Infectología y Alergia e Inmunología de Cuyo - III Jornadas Mendocinas de Zoonosis; 2006

Asociación Argentina de Microbilogía (Filial Cuyo), Sociedad de Infectología de Mendoza, Sociedad de Alergia, Asma e Inmunología de Mendoza

Clostridium difficile es el principal agente etiológico responsable de casos de diarrea asociada a antibióticos. Presenta, como muchos otros géneros bacterianos, una estructura proteica superficial denominada capa S. El objetivo del presente trabajo fue obtener anticuerpos anti-capa S y anti-bacteria entera para ser utilizados en la detección de Clostridium difficile en presencia de otras especies bacterianas. Como fuente de antígenos de emplearon 4 cepas de Clostridium difficile: ATCC 9889, ATCC 43593, 116 y 117 (dos aislados clínicos). Se inmunizaron ratones BALB/c intraperitonealmente empleando adyuvante de Freund incompleto. La reactividad de los anticuerpos obtenidos se analizó por ELISA e inmunoblotting. Los títulos determinados por ELISA fueron variables (de 1/1000 hasta >1/30000) dependiendo del antígeno. Por otro lado, se observó reactividad cruzada entre las diferentes cepas de Clostridium difficile tanto por ELISA como por inmunoblotting. Sin embargo, ninguno de los antisueros mostró reactividad contra la cepa CIDCA 5323 de Bifidobacterium longum. Además, el empleo de uno de los antisueros obtenidos en ensayos de inmunofluorescencia permitió detectar específicamente Clostridium difficile  en una mezcla de clostridios y bifidobacterias. Estos anticuerpos proporcionarán una herramienta importante para ser utilizada como revelador selectivo durante ensayos in vitro de competencia clostridio-bifidobacterias y en modelos in vivo de infección.