Avances en la caracterización de dos baculovirus aislados de la oruga medidora, Rachiplusia nu (Lepidoptera: Noctuidae).

ARNEODO, J.; JAKUBOWICZ, V.; TAIBO, C.; SCIOCCO-CAP, A.

Córdoba

Jornada; XV Jornadas Argentinas de Microbiología; 2014

Asociación Argentina de Microbiología

La oruga medidora, Rachiplusia nu, es originaria de América del Sur. Esta especie defoliadora, muy voraz y polífaga, ocasiona daños de importancia en alfalfa, girasol, soja, lino y algunas hortícolas. En el marco de las estrategias de manejo integrado de plagas, los entomopatógenos, entre ellos los baculovirus,  pueden ser una herramienta para reducir las poblaciones de lepidópteros en el cultivo. En este trabajo, se exponen los resultados preliminares de la caracterización de dos aislamientos baculovirales conservados en la colección del Laboratorio de Virus Entomopatógenos del IMyZA-INTA Castelar. Los mismos fueron obtenidos y multiplicados a partir de ejemplares de R. nu naturalmente infectados colectados en campo (Oliveros, Sta. Fe) en 1992 y 1994. Los estudios involucraron la realización de bioensayos, microscopía óptica y electrónica, y para el caso del aisl-1992, la amplificación y secuenciación parcial del gen de la poliedrina (altamente conservado, comúnmente utilizado en taxonomía de baculovirus). Para evaluar la infectividad de ambos aislamientos (mantenidos en freezer a -20° C) se usó el método de suministro de virus por vía oral mediante líquido con colorante y fagoestimulante (?drop-feeding method?). Se trabajó con larvas hambreadas de tercer estadio de R. nu y Epinotia aporema (Lepidoptera: Tortricidae) provenientes de cría en laboratorio, siendo las dosis de aprox. 1000 cuerpos de oclusión (OBs) por larva. Éstas fueron llevadas a cámara de cría (26 °C) y alimentadas con dieta artificial. A tres días post-infección, ya se visualizaban OBs por microscopía óptica en la hemolinfa de ejemplares de R. nu, y a los 6 días la mortalidad de las larvas de esta especie expuestas a cualquiera de los aislamientos alcanzó el 100%. Los testigos sanos de R. nu (colorante y fagoestimulante, sin virus) y los ejemplares de E. aporema, en cambio, se desarrollaron normalmente hasta el estado de pupa. Los OBs fueron extraídos de los cadáveres de R. nu infectados y observados en microscopio electrónico de barrido. Se registraron dos tipos de morfología: el aisl-1992 estaba constituido por poliedros piramidales, mientras que los OBs del aisl-1994 mostraron una forma cúbica que concuerda con Autographa californica Nucleopolyhedrovirus, ya identificado en R. nu en Argentina (Rodríguez et al., Int. J. Virol. Mol. Biol. 1:28-34). La secuencia parcial del gen de la poliedrina del aisl-1992 presentó un máximo de 88% de identidad nucleotídica con un nucleopoliedrovirus aislado de Trichoplusia ni (polilla perteneciente a la subfam. Plusiinae, al igual que R. nu).  La evidencia indica, por lo tanto, que se trata de un virus aún no descripto, lo que amerita continuar los estudios tendientes a su caracterización biológica y molecular. Respecto al aisl-1994, se realizarán los análisis moleculares correspondientes para corroborar su identidad. Para ambos, se completarán ensayos de virulencia y patogenicidad en vistas de su posible empleo como controladores biológicos.