Desarrollo de estrategias tendientes a optimizar la eficiencia de bioinsecticidas baculovirales en el control de Cydia pomonella

ARNEODO, J.; QUINTANA, G.; SALVADOR, R.; FARINON, M.; SCHULZE-BOPP, S.; EBERLE, K.; JEHLE, J.; SCIOCCO-CAP, A.

Villa Giardino, Córdoba

Congreso; XXX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Virología; 2010

Sociedad Argentina de Virología

Antecedentes La oruga de la pera y la manzana (Cydia pomonella) es plaga clave de frutales. El granulovirus homónimo (CpGV, Baculoviridae) es una de las herramientas básicas para su control en producciones orgánicas e integradas. La aparición de resistencia a bioinsecticidas comerciales basados en el aislamiento CpGV-M en poblaciones europeas de C. pomonella motivó el desarrollo de estrategias para un uso sustentable de este virus y para evitar la aparición de este fenómeno en poblaciones argentinas de la plaga. Las estrategias incluyen monitoreo de susceptibilidad de poblaciones a CpGV-M, la evaluación de nuevos aislamientos, actividades de extensión y asesoramiento a productores, así como estudios de interacción huésped-patógeno. Objetivo Validación de metodologías para el monitoreo de susceptibilidad a CpGV-M y búsqueda de nuevos aislamientos virales. Materiales y Métodos Se colectaron larvas en montes de manzana y nogal de Río Negro, Catamarca y La Rioja, estableciéndose pies de cría para la realización de bioensayos. Además, se evaluó la susceptibilidad de larvas obtenidas directamente en campo. Se realizaron bioensayos con tres aislamientos virales (incluido CpGV-M), por incorporación de 5,8 x 10exp4 cuerpos de oclusión (OBs) por ml. de dieta, dosis efectiva en poblaciones susceptibles. La presencia de CpGV en larvas, pupas y/o adultos fue determinada mediante PCR con iniciadores específicos para el ORF de granulina. Algunas de las larvas enfermas o muertas con síntomas de granulovirosis se conservaron a -20ºC para purificación de OBs y ADN viral. Resultados Hasta el presente no se detectó resistencia a CPGV en poblaciones argentinas de la plaga, obteniéndose un 100% de mortalidad con la dosis y aislamientos ensayados. La alta incidencia de virus en las larvas colectadas en campo (30-40%) y en las crías de laboratorio resultantes (11-25%) obstaculizó la realización de estudios complementarios, por lo que se efectuaron nuevas colectas en zonas no tratadas. A partir de parejas de adultos sanos se estableció una colonia libre de virus (condición confirmada por PCR). Con las larvas enfermas o muertas con síntomas típicos de granulovirosis se inició una colección de OBs y ADN viral purificados. Las muestras se rotularon según procedencia para identificar posibles nuevas variantes de CpGV. Conclusión La resistencia a CpGV detectada en Europa es el primer caso de ocurrencia de este fenómeno en baculovirus, lo que subraya la importancia de las estrategias diseñadas para el manejo de este tipo de bioinsecticidas. La problemática de establecimiento de colonias sanas se ve acentuada por la posibilidad de transmisión vertical del virus. Dado que la producción de CpGV se realiza in vivo, es importante evitar la selección de variantes poco virulentas en las crías. La metodología desarrollada para la obtención de una colonia libre de virus constituye una herramienta aplicable al control de calidad del proceso de producción del bioinsecticida. La diversidad genómica contribuye a evitar la aparición de resistencia y aporta a la eficacia biocontroladora de los baculovirus. En tal sentido, se dispone de una colección de aislamientos de CpGV a ser analizados y evaluados.