Estudios de genes simbióticos en microsimbiontes de maní nativos de los suelos de la provincia de Córdoba

TAURIAN, T., IBAÑEZ, F., FABRA, A., AGUILAR, O.M.

Mar del Plata

Congreso; Primer Congreso Argentino de Microbiología General; 2004

Sociedad Argentina de Microbiología General

Resumen El 94% de la producción nacional de maní (Arachis hypogaea L.) se concentra en la región centro-sur de la provincia de Córdoba. Teniendo en consideración que la bibliografía que describe a los rizobios nodulantes de maní es escasa, y más aún aquella referida a la población nativa de Argentina, y dada la relevancia del cultivo de esta leguminosa en la provincia de Córdoba, resultó de interés analizar la diversidad de los rizobios que la nodulan. Dicho análisis se efectuó en una colección de 39 aislamientos y comprendió estudios de caracterización fenotípica y genotípica. A partir de los resultados obtenidos fue posible distinguir dos grupos diferenciados por su velocidad de crecimiento, uno de crecimiento lento y otro de crecimiento rápido, cada uno de los cuales reveló una gran heterogeneidad genotípica. A los fines de agrupar taxonómicamente a los microsimbiontes de maní con especies de rizobios conocidas, fueron obtenidas las secuencias del 16S ADN ribosomal de tres aislamientos de la colección, uno de ellos representante del grupo de aislamientos lentos y los otros dos de los rápidos. El resultado del alineamiento de las mismas con las secuencias disponibles en las bases de datos demostró que la correspondiente al aislamiento de crecimiento lento presentó un 98% de identidad con especies pertenecientes al género Bradyrhizobium. Por otro lado, las secuencias obtenidas para los dos aislamientos de crecimiento rápido indicaron una elevada identidad con especies del género Rhizobium. Considerando la importancia de los genes simbióticos para el establecimiento de la simbiosis rizobios-leguminosas  y, dado que la capacidad de nodular maní es el rasgo común entre los aislamientos estudiados, surgió el interés en encarar el análisis de estos genes. Los genes simbióticos analizados fueron los genes de nodulación nodC y nodA y los genes de fijación nifH y nifD. En primer lugar se determinó la presencia de estos genes por estudios de PCR, empleando cebadores diseñados a partir de secuencias de rizobios conocidas. Posteriormente, se analizaron las secuencias de los productos de amplificación obtenidos mediante RFLP. Los resultados de estos análisis demostraron que los aislamientos presentan secuencias de genes nod y nif  que divergen entre ellos y respecto a especies rizobianas conocidas. Con el objetivo de completar estos estudios se han clonado los genes nodC y nifH de los aislamientos de crecimiento rápido para obtener la secuencia de los mismos.