Echinococcus granulosus: Establecimiento del cultivo primario a partir de protoescólices

ALBANI, C. CHISARI, A; ELISSONDO, MC; DENEGRI, G.

Mar del Plata

Congreso; Reunión Anual de SAIC SAI SAFIS 2007; 2007

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La posibilidad de obtener cultivos de células de helmintos parásitos ha sido raramente explotada hasta el presente. Por lo cual, el establecimiento del cultivo primario del estadio larval de E. granulosus sería de gran importancia no solo para comprender con mayor profundidad el ciclo de vida de este parásito, sino también para analizar sus propiedades bioquímicas y metabólicas con el objetivo de desarrollar nuevas y más eficientes alternativas terapéuticas. El objetivo de este trabajo fue poner a punto el método de cultivo celular in vitro de E. granulosus. Los protoescólices fueron digeridos con tripsina al 0.25% durante 30 min a 37 ºC con agitación constante. Luego las células fueron colectadas por centrifugación. Se les midió la viabilidad y se las colocó en botellas de cultivo conteniendo medio 199 suplementado con antibióticos, glutamina 2mM, 2-mercaptoetanol 5.10-5 M, 10% de líquido hidatídico y 10% de suero fetal bovino. Las botellas fueron colocadas en estufa a 37 ºC y si bien el cambio de medio se realizó cada 48 hs, las células fueron observadas diariamente. Empleando la técnica descripta fue posible obtener cultivos primarios a partir de células de protoescólices. Mediante el uso de microscopio invertido, entre las 24 y 48 hs se pudieron observar diferentes tipos celulares y en todos los casos grupos de células adaptadas emitiendo prolongaciones. Hacia el futuro se espera lograr las condiciones óptimas para la multiplicación y diferenciación celular. Además lograr el establecimiento de un a línea celular, lo cual constituye una poderosa herramienta tanto para llevar a cabo estudios a nivel molecular, como para realizar screening de nuevas drogas.