Evaluación de la actividad antihelmíntica in vitro del flubendazole sobre microquistes de Echinococcus granulosus

ELISSONDO, M.C.; DOPCHIZ, M.C.; BRASESCO, M.; CEBALLOS, L.; ALVAREZ, SÁNCHEZ BRUNI, S.; LANUSSE, C. & DENEGRI, G.

Bahía Blanca

Jornada; XI Jornadas Argentinas de Microbiología, II Jornadas de Microbiología e Infectología del Sur Argentino; 2005

Asociación Argentina de Microbiología-Filial Sur, Dpto de Biología, Bioquímica y Farmacia de la Universidad Nacional del Sur

Hasta el momento la droga más utilizada para el tratamiento de la hidatidosis en el hombre es el albendazole. Flubendazole (FLBZ) no ha sido considerada como una droga adecuada debido a que en humanos demostró baja eficacia. En trabajos previos, FLBZ en concentraciones de 10, 5 y 1 ug/ml produjo un marcado efecto protoescolicida in vitro. El objetivo de este trabajo fue analizar el efecto del FLBZ sobre microquistes de E. granulosus obtenidos por cultivo in vitro. Se utilizaron protoescólices extraídos de quistes hidatídicos de hígados bovinos. En tubos Leighton se colocaron 1500 protoescólices con medio 199 (M199) adicionado con  glucosa, penicilina y estreptomicina. Entre los 38-50 días se obtuvieron microquistes totalmente desarrollados. Posteriormente se distribuyeron aproximadamente 50 microquistes por cada 10 ml de medio de cultivo. El FLBZ se disolvió en dimetilsulfóxido (DMSO) y se agregó al medio en concentraciones finales de 5 y 1 µg/ml. No se realizaron cambios de medio. Microquistes incubados en M199 y con DMSO se utilizaron como controles. Los tubos se observaron diariamente al microscopio invertido registrando las variaciones observadas. Se fotografiaron los cambios observados. El experimento se repitió 2 veces. Cada prueba duró 15 días. Al finalizar se tomaron muestras para microscopía electrónica de transmisión (MET). Los microquistes control incubados en medio 199 y DMSO permanecieron turgentes y sin cambios estructurales durante el período del experimento. Los microquistes tratados con FLBZ en concentraciones de 5 y 1 μg/ml presentaron cambios al microscopio invertido entre el tercer y quinto día. Los microquistes perdieron turgencia y se observaron alterados y descoloridos. Durante el proceso de degeneración del microquiste, la membrana germinal se separó de la laminar y se observó una masa necrótica central en los mismos. Al finalizar el tratamiento los microquistes se encontraban totalmente degenerados, presentado completamente alterada su estructura característica. El estudio al MET reveló en los microquistes tratados la presencia de alteraciones en la membrana germinativa. Se comprobó la eficacia in vitro del FLBZ en este estadio del parásito. En trabajos posteriores se estudiará el efecto in vitro del fármaco sobre quistes obtenidos en ratones y su eficacia en un modelo animal. En éste, el compuesto activo debe alcanzar el órgano infectado y el tejido parasitario en concentraciones lo suficientemente altas para producir alteraciones.