EL VIRUS JUNÍN AUMENTA LA EXPRESIÓN DE SU RECEPTOR EN CÉLULAS PROGENITORAS HEMATOPOYÉTICAS Y ALTERA LA PRODUCCIÓN DE PLAQUETAS IN VITRO A TRAVÉS DE UNA MODULACIÓN DIFERENCIAL DEL NF-E2.

POZNER, ROBERTO G.; D’ATRI, LINA P.; NEGROTTO, SOLEDAD; MALAVER, ELISA; PACIENZA, NATALIA; TORRES, OSCAR; ROMANOWSKI, VICTOR; SCHATTNER, MIRTA; GOMEZ, RICARDO M.

Ciudad de Buenos Aires

Congreso; XX Congreso del CLAHT – VIII Congreso del CAHT; 2008

Grupo CLAHT – Grupo CAHT

El virus Junín (VJ) es el agente etiológico de la Fiebre Hemorrágica Argentina (FHA), entidad en la cual los pacientes presentan diversas alteraciones hematológicas incluyendo trombocitopenia. Si bien no se conoce su origen, la misma constituye un signo de gran valor diagnóstico. Previamente demostramos que la infección de células CD34+ con VJ no afecta la proliferación y diferenciación de megacariocitos inducida por trombopoyetina (TPO), sin embargo, disminuye significativamente la producción de plaquetas (trombopoyesis) in vitro. Esta respuesta es mediada, al menos en parte, por interferón tipo I (IFN I). Recientemente se ha descrito al receptor de transferrina (TfR1) como el receptor celular de éste y otros arenavirus. En este trabajo evaluamos  la expresión  del TfR1 y  su rol en la inhibición de la trombopoyesis mediada por VJ. Los resultados muestran que la infección con VJ aumenta significativamente la expresión del TfR en células CD34+ estimuladas con TPO (citometría de flujo, gráfico, n=3, *p<0,05 vs. control) sugiriendo un posible mecanismo de retroalimentación positiva no descripto para este virus. La adición de IFN I (alfa o beta, 500 U/ml) no reproduce este efecto (gráfico). El bloqueo del TfR1 con anticuerpos específicos revierte el efecto inhibitorio del VJ sobre la generación de plaquetas, evaluada por citometría de flujo (Control: 1507±101, VJ: 836±133, anti-TfR1+VJ: 1366±250; número de plaquetas expresado en unidades arbitrarias, n=3). Sin embargo, el aumento en los niveles del TfR1 inducido por deprivación de hierro no modifica la disminución de plaquetas (865±222 plaquetas). Teniendo en cuenta que GATA-1 y NF-E2 son dos de los factores de transcripción más relevantes involucrados en la megacariocito/trombopoyesis también evaluamos su expresión a lo largo del cultivo. Mediante RT-PCR semicuantitativa, se observó una disminución del ARNm de NF-E2 en cultivos infectados mientras que los niveles de GATA-1 fueron similares al control. En concordancia, los niveles proteicos de NF-E2 en megacariocitos (determinados por citometría de flujo de dos colores) también fueron modulados negativamente por la infección (C día 7: 353±12, VJ día 7: 292±1*; C día 14: 402±14, VJ día 14: 346±2*, n=3, *p<0,05 vs. control). En conjunto, estos resultados señalan que el VJ facilitaría su propio ingreso en las células CD34+ e inhibiría selectivamente la generación de plaquetas in vitro como consecuencia de la disminución de la síntesis de NF-E2. Este mecanismo podría explicar la trombocitopenia asociada a la FHA y otras enfermedades virales.