Alteraciones de la megacario/trombopoyesis y la función plaquetaria mediadas por Interferón beta.

RIVADENEYRA, LEONARDO; POZNER, ROBERTO G.; FONDEVILA, CARLOS; MEISS, ROBERTO; GOMEZ, RICARDO M.; SCHATTNER, MIRTA.

C.A.B.A.

Congreso; XI Congreso del Argentino del Grupo Cooperativo Argentino de Hemostasia y Trombosis (CAHT).; 2014

Grupo Cooperativo Argentino de Hemostasia y Trombosis (CAHT).

Previamente demostramos que el tratamiento de ratones con Poly(I:C), mimético del ARN doble cadena y agonista del receptor tipo Toll (TLR) 3, disminuye la producción de plaquetas, aumenta el volumen plaquetario medio (VPM) y disminuye la funcionalidad de plaquetas (unión del fibrinógeno y expresión de P-selectina) asociado a un aumento en los niveles de Interferón beta plasmático (pIFN). En este trabajo profundizamos estos hallazgos. Ratones C57BL/6J fueron inoculados diariamente con Poly(I:C) (25 µg/ratón) y luego de 72hs se evaluaron diferentes parámetros. Los resultados se expresan como % del control y media±EEM. * p< 0,05 vs. control. La menor unión de fibrinógeno observada previamente se reflejó en una menor adhesión de las plaquetas a dicho sustrato (58±6%*, ELISA). Sin embargo y sorpresivamente, el spreading plaquetario fue mayor en ratones tratados (168±11%*, microscopía) y se acompañó de un acortamiento en el tiempo de retracción del coágulo, indicando un mecanismo compensatorio a la disminución cuali/cuantitativa de las plaquetas. La disminución en la expresión de P-selectina se correlacionó con una menor formación de agregados plaquetas-neutrófilos inducida por trombina (41±8 %*). Estudios histológicos de médula ósea mostraron un aumento del tamaño de los megacariocitos debido al tratamiento con Poly(I:C) (224±14%*), así como también una menor asociación de los mismos con los sinusoides (47%). El tratamiento con diferente dosis de Poly(I:C), nos permitió determinar que los niveles de pIFN se correlacionaron con el recuento plaquetario, el VPM, la unión de fibrinógeno, la exposición de P-Selectina y el tamaño de megacariocitos. (R2=0.94, 0.96, 0.94, 0.92 y 0.95, respectivamente). La administración de Imiquimod (n=9), agonista del receptor tipo Toll-7 aumentó los niveles de pIFN (44±9* vs 0pg/ml, ELISA) disminuyo el recuento plaquetario (73±2%*) y la unión de fibrinógeno (65±6%*) mientras que el tratamiento con Poly (I:C) de ratones KO para el receptor de IFN no alteró ninguno de los parámetros anteriores, a pesar de que los niveles de pIFNβ fueron similares a los de ratones salvajes (n=6). En conjunto, estos resultados indican que el aumento de pIFN endógeno altera la biogénesis plaquetaria induciendo cambios en la morfología y distribución de los megacariocitos en el nicho vascular así como también afectando la funcionalidad plaquetaria.