Señalización no genómica del NFkappaB en plaquetas.

D'ATRI, LINA P; MALAVER, ELISA; POZNER, ROBERTO G; NEGROTTO, SOLEDAD; PACIENZA, NATALIA; BENZADON, R; LAZZARI, MARÍA A; SCHATTNER MIRTA

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LII Reunión anual de la SAIC / LV Reunión anual de la SAI.; 2007

El complejo NFkB/IkB tiene un rol crítico en la regulación de la expresión de genes que controlan procesos de diferenciación, proliferación, inflamación, oncogénesis y apoptosis. Previamente se ha demostrado que las plaquetas expresan el factor de transcripción NFκB y que la estimulación con Trombina (TR) promueve la degradación del mismo; sin embargo, se desconoce la importancia de esta respuesta en la fisiología plaquetaria. En este trabajo evaluamos el rol del NFκB en la activación plaquetaria. La preincubación de plaquetas humanas con un inhibidor específico de NFκB, Bay 11-7082 (Bay, 100 μM) inhibió la agregación (determinada por turbidimetría) inducida por ADP (79±8% de inhibición, p<0,0001), colágeno (70±8%, p<0,01) y adrenalina  (67±6%, p<0,001) (n=5). En plaquetas lavadas, la agregación estimulada por TR disminuyó 62±11% (n=8, p<0,001). La liberación de ATP (evaluada por luminiscencia) en plaquetas estimuladas con ADP fue significativamente disminuida en presencia de Bay (2.84 ±1 vs 0.5±0.2 μM, p<0.05, n=3). La exposición de sitios de unión al fibrinógeno (medido por la unión al anticuerpo PAC-1 por citometría de flujo) mostró que el porcentaje de células positivas para PAC-1 inducido por TR fue inhibido por Bay (C: 3±1, TR: 47±10, TR+Bay: 22±5* %, n=3, *p<0,05 vs TR). En ensayos de Western Blot se observó que la estimulación de plaquetas con TR y ADP induce la degradación de IκB y este fenómeno es revertido en presencia de Bay. Para analizar el rol de NFκB en la activación de plaquetas in vivo, se inocularon ratones con Bay (10 mg/kg). Luego de 24 hs, la agregación plaquetaria inducida por ADP fue inhibida en un 57±3% respecto a la agregación en los ratones control (n=7, p<0,05). Estos hallazgos proponen una novedosa acción no genómica del NFκB/IκB y sugieren que la activación del mismo sería otra vía de señalización involucrada en la activación plaquetaria.