ROL DE LOS AGONISTAS PPARgamma EN LA REGULACION DE LA SOBREVIDA DE CELULAS PROGENITORAS HEMATOPOYÉTICAS.

D'ATRI, LINA P; PACIENZA, NATALIA; POZNER, ROBERTO G; NEGROTTO, SOLEDAD; MALAVER, ELISA; LAZZARI, MARÍA A; TORRES, OSCAR; GOMEZ, RICARDO M; SCHATTNER MIRTA

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LII Reunión anual de la SAIC / LV Reunión anual de la SAI.; 2007

Previamente demostramos que ligandos del PPARg como el endógeno 15d-PGJ2 (PGJ) y el sintético, ciglitazona (CGZ), inhiben la proliferación de precursores megacariocíticos por arresto del ciclo celular y apoptosis. Con el fin de profundizar estos hallazgos se analizó el efecto de ambas drogas en la formación de colonias megacariocíticas en geles de colágeno utilizando células CD34+ aisladas de sangre de cordón umbilical mediante inmunoselección magnética.El número de colonias disminuyó significativamente de manera concentración dependiente (n=3) por el tratamiento de las células CD34+ con ambas drogas. Con el fin de estudiar si este efecto era específico del linaje megacariocítico, CD34+ fueron expandidas con EPO, IL3, SCF, G-CSF o GM-CSF con o sin PGJ CGZ. Posteriormente se evaluó apoptosis y viabilidad celular por microscopía de fluorescencia y ensayo de MTT. Ambos agonistas indujeron un significativo incremento en los niveles de apoptosis así como también una significativa disminución en la viabilidad  celular independientemente del factor de crecimiento. El efecto de PGJ o CGZ en  la capacidad formadora de colonias granulocíticas, eritroides o mixtas de CD34+ se examinó en ensayos clonogénicos con metilcelulosa. Se observó una marcada disminución  en el número total de colonias obtenidas (control=66±5, PGJ=27±6, CGZ=13±5, n=3, p<0,001) a expensas de un descenso en cada una de los linajes.Considerando que PGJ y CGZ actúan por mecanismos dependientes e independientes del receptor, analizamos la acción del GW9062, inhibidor del (PPARg) y del BAY7082, inhibidor específoc de NFkB. La apoptosis mediada por PGJ no fue  modificada por el tratamiento con GW9062, pero aumentó significativamente en presencia del BAY (C=10±1, BAY=19±3, PGJ=22±5, ambos=33±6, n=5, p<0,05). Los mecanismos de apoptosis inducida por ambas drogas incluyen la activación de la vía intrínseca o mitocondrial ya que en las células expuestas a PGJ o CGZ se observó un aumento del potencial de membrana mitocondrial, un incremento en la expresión de Bcl-xl y del fragmento activo de caspasa 3. En conjunto estos datos muestran que la PGJ y la CGZ no solamente inhiben el crecimiento de megacariocitos sino que también tienen un efecto regulador negativo de la hematopoyesis asociado a una acción indirecta sobre el factor de transcripción NFkB. Estos hallazgos serían un aspecto a considerar en el uso terapéutico de la CGZ como hipoglucemiante y del emergente uso de ambas drogas como  antineoplásicos.