La acidosis extracelular promueve la apoptosis de Células Madre Hematopoyéticas.

D’ATRI, LINA P; MALAVER, ELISA; PACIENZA, NATALIA; POZNER, ROBERTO G; NEGROTTO, SOLEDAD; GOMEZ, RICARDO M; SCHATTNER, MIRTA

Mar del Plata, Argentina.

Congreso; II Reunión anual de la SAIC / LV Reunión anual de la SAI.; 2007

Las células madre hematopoyéticas (HSC, CD34+) han sido tradicionalmente utilizadas para transplante de médula ósea. Investigaciones recientes mostraron el potencial de estas células en la regeneración de tejidos. La acidosis extracelular es un regulador crítico de respuestas de activación y sobrevida de diferentes tipos celulares. El desarrollo de microambientes acídicos está asociado no solamente con procesos inflamatorios sino también con el desarrollo tumoral o tejidos isquémicos. Considerando que uno de los potenciales usos clínicos de las HSC es la revascularización y regeneración celular en pacientes con infarto de miocardio o accidente cerebrovascular, en este trabajo evaluamos el impacto del medio ácido en la sobrevida de HSC. Células CD34+ fueron obtenidas de sangre de cordón umbilical por inmunoselección magnética positiva. El análisis de cambios nucleares evaluado por microscopia de fluorescencia utilizando naranja de acridina y bromuro de etidio mostró que el cultivo de células CD34+ en un medio acido (pH6.5) durante 48 horas aumentó significativamente la apoptosis (pH7.4: 18±4, pH6.5: 53±6% n=9). La inducción de apoptosis fue confirmada por citometría de flujo que mostró un aumento de células positivas para anexina V (pH7.4: 28, pH6.5: 75%, n=2) y de células hipodiploides (pH7.4: 8, pH6.5: 45%, n=2). Factores de crecimiento con actividad antiapoptótica como TPO, SCF e IL-3 asi como el análogo del AMPc (BIMPs) revirtieron significativamente la apoptosis de los cultivos en medio ácido (C: 53±6, TPO: 30±4, SCF: 30±6, IL-3: 10±4, BIMPs: 37±6 %, p<0.05 vs C, n=6). Sin embargo, en todos los casos, la sobrevida celular no alcanzó el nivel de los cultivos control (pH7.4, n=3). El VEGF (10 ng/ml) no modificó la apoptosis inducida por el medio ácido. La exposición de HSC a pH 6.5 disminuyó los niveles de Bcl-xl evaluados por citometría de flujo (pH7.4: 17; pH6.5: 5% n=2). Estos hallazgos demuestran que la acidosis extracelular promueve la apoptosis de HSC.