PAPEL DE LA TROMBOPOYETINA Y LA PROSTACICLINA EN LA APOPTOSIS DE CÉLULAS MADRES PLURIPOTENTES (CD34+).

NEGROTTO, SOLEDAD; POZNER, ROBERTO G.; D´ATRI, LINA P.; GOMEZ, RICARDO M.; LAZZARI, MARIA A.; SCHATTNER, MIRTA

Mar del Plata, Argentina.

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas.; 2004

SAIC/SAI/SAFE/SABiología/SABiofísica/SAN/SAF.

Previamente demostramos que la prostaciclina (PGI2 ) y la trombopoyetina (TPO) protegen a los megacariocitos de la apoptosis inducida por óxido nítrico (ON). En este trabajo estudiamos el papel de estas moléculas en la regulación de la apoptosis inducida por deprivación de suero (SS) y ON en células madres (CD34+). Las células fueron purificadas a partir de sangre de cordón umbilical humano por inmunoselección magnética positiva. La apoptosis se evaluó luego de 24 horas por microscopía de fluorescencia utilizando una mezcla de naranja de acridina y bromuro de etidio y por citometría de flujo evaluando el contenido de ADN por incorporación de ioduro de propidio. La TPO (100 ng/ml) inhibió significativamente la apoptosis inducida por deprivación de suero (C: 3±1, SS: 26±3*, TPO+SS: 12±2# %,  n=4) y por el dador de ON, PAPA/ON (100 mM) (C: 4±1, ON: 17±2*, TPO+ON: 10±1& %,  n=3). Sin embargo, la PGI2 no fue capaz de modular la muerte celular inducida por ambos estímulos (C: 4±1, SS: 26±3, PGI2+SS: 27±2, ON: 17±2, PGI2+ON: 18±2 %, n=5). La falta de efecto por PGI2 (100 ng/ml) podría deberse a la ausencia de su receptor de superficie en células indiferenciadas ya que el análogo permeable de AMPc, Dibutiril-cAMP (100 mM) revirtió significativamente tanto la apoptosis inducida por deprivación de suero (12±3# %, n=4) como por ON (10±2& %, n=4). *p<0.05 vs control, #p<0.05 vs SS, &p<0.05 vs ON. Estos resultados demuestran que tanto la TPO como el AMPc protegen la apoptosis de células madres inducida por estímulos diferentes.