APOPTOSIS DE LEUCOCITOS POLIMORFONUCLEARES: REGULACIÓN POR CITOQUINAS Y DROGAS ANTIINFLAMATORIAS

NEGROTTO, SOLEDAD; MALAVER, ELISA; PACIENZA, NATALIA; D’ATRI, LINA P; POZNER, ROBERTO G; GÓMEZ, RICARDO M;; SCHATTNER, MIRTA

Buenos Aires, Argentina

Congreso; VI CONGRESO ARGENTINO DE HEMOSTASIA Y TROMBOSIS; 2006

CAHT

Previamente demostramos que la aspirina (ASA) y el salicilato de sodio (NaSal) inhiben la sobrevida de los leucocitos polimorfonucleares (PMN) mediada por lipopolisacáridos bacterianos (LPS). En este trabajo profundizamos estos estudios. Los PMN fueron aislados de sangre periférica de dadores sanos y resuspendidos en medio RPMI con suero fetal bovino (5%). La apoptosis se midió luego de 18 horas por microscopía de fluorescencia y citometría de flujo. El tratamiento de los PMN con ASA y NaSal suprimió el efecto antiapoptótico mediado no solo por LPS sino también por IL-1α (10ng/ml) (EC50=1.39mM y 1.28mM, n=6). Ambas drogas ejercieron un efecto proapoptótico directo solo en altas concentraciones (10mM). La acción de los salicilatos no es debido a la inhibición de las ciclooxigenasas ya que otros inhibidores estructuralmente no relacionados como la Indometacina (Indo) y el Ibuprofeno (Ibu) no produjeron ningún efecto (1-100µM, n=4). La ASA y el NaSal (3mM), aunque no la Indo o el Ibu (100 µM), bloquearon la degradación del inhibidor de NFkB (IkB) mediada por LPS (0.5 µg/ml) detectada por Western Blot (Figura 1, *p<0.05 vs control, #p<0.05 vs LPS solo, n=5). La acción antiapoptótica del GM-CSF (independiente de NFkB) no fue regulada por los salicilatos (n=5). Utilizando un modelo de peritonitis inducida por tioglicolato, observamos que los ratones tratados con ASA o NaSal mostraron no solo una disminución en el número de células reclutadas al foco inflamatorio (1.3±0.3, 1.7±0.4 x106 células/ml) sino también un aumento en el porcentaje de apoptosis (28±5, 23±2%) y de fagocitosis de PMN por macrófagos residentes (45±4, 48±6%, tinción de preparados con May Grunwald-Giemsa) con respecto al control (3.3±0.3 x106 células/ml, 9±2%, 17±5%, n=5). Estos resultados demuestran que los salicilatos favorecen la resolución de la inflamación inhibiendo las señales de sobrevida mediadas por NFkB y acelerando la remoción de los PMN del foco inflamatorio.