Efecto en la polarización de la respuesta macrófagica por lípidos de promastigotes de Leishmania amazoniensis y Leishmania braziliensis

LÓPEZ, SEBASTIÁN ; PENAS, FEDERICO; LAUTHIER JUAN JOSÉ; CADENA, FERNANDA; GOREN, NORA; RUYBAL, PAULA; GIMENEZ, GUADALUPE; BELAUNZARÁN, MARÍA LAURA

Simposio; XX Simposio Internacional sobre Enfermedades Desatendidas; 2021

Introducción: La Leishmaniasis es una parasitosis causada por diversas especies del género Leishmania y que junto con los mecanismos inmunes del hospedero resulta en un amplio espectro de manifestaciones clínicas, histopatológicas e inmunopatológicas. En Argentina coexisten L. braziliensis, L. amazonensis y L. guyanensis, responsables de la Leishmaniosis humana cutánea. Los macrófagos constituyen un grupo muy heterogéneo con múltiples funciones, dando lugar a su clasificación en fenotipos M1 y M2 (activación clásica y alternativa respectivamente), representando dos extremos en el espectro de activación macrofágica, los cuales son selectivamente invadidos por Leishmania spp. El control de la infección por este patógeno requiere la generación de una respuesta con perfil Th1, con activación clásica de macrófagos dependiente de IFNγ, aunque este microorganismo ha desarrollado diversas estrategias para evadir la respuesta inmune tales como la inducción de macrófagos M2, entre otros. Por otra parte, existe evidencia del rol inmunomodulador que cumplen los lípidos de los microorganismos en la activación de la inmunidad innata. En este sentido, en trabajos previos analizamos el perfil lipídico y el efecto de los lípidos totales de L. braziliensis en la activación de macrófagos murinos (Carfagna y col. 2020). Resultados: En el presente trabajo analizamos de forma comparativa el efecto de los lípidos totales de promastigotes de L. amazoniensis (Lama) y de L. braziliensis (Lbra) sobre la activación macrofágica. Demostramos que tanto Lama como Lbra inducen de manera similar la formación de cuerpos lipídicos, marcadores de activación leucocitaria. En relación a la actividad de la enzima óxido nítrico sintetasa inducible (iNOS) Lama indujo la producción de óxido nítrico, determinado por reacción de Griess, mientras que Lbra no mostró diferencias significativas con el control. Por otra parte, Lama y Lbra indujeron la actividad y expresión de la enzima Arginasa-1 (marcador M2), determinado por inmunoblot. Esta enzima compite por el mismo sustrato con iNOS (marcador M1). Evaluamos por PCR en tiempo real otros marcadores a las 24hs post-estimulación, determinando que Lama indujo mayores niveles de expresión de ARNm de TNFα (marcador M1) con respecto a Lbra y que estos en contraste indujeron niveles significativos de expresión de ARNm de IL-10. Se analizaron también los marcadores M2: FIZZ1 e YM1 determinándose que ambos estímulos lipídicos indujeron niveles significativos de ARNm respecto al control. Conclusiones: Nuestros resultados indican que los promastigotes de L. amazoniensis y L. braziliensis poseen moléculas lipídicas bioactivas, capaces de modular la respuesta inflamatoria en macrófagos. Esto podría contribuir al control o la supervivencia del parásito y por lo tanto influir en la patogénesis de la leishmaniasis. Financiado por UBA/CONICET/FONCyT.