ADHESIÓN DE ESPERMATOZOIDES EQUINOS SOBRE HIDROGELES DE POLIACRILAMIDA: EFECTO DE LA CARGA IÓNICA DEL HIDROGEL

EBEL, FRANCISCA; LIAUDAT, ANA CECILIA; BLOIS, DAMIAN; RODRIGUEZ, NANCY; RIVAROLA, CLAUDIA R.; BOSCH, PABLO

Congreso; IV REUNIÓN CONJUNTA DE SOCIEDADES DE BIOLOGÍA DE LA REPÚBLICA ARGENTINA; 2020

Los hidrogeles poliméricos son materiales blandos ampliamente utilizados en biotecnología. Nuestro grupo de trabajo demostró que hidrogeles sintetizados a partir de poliacrilamida (PAAm) son potenciales dispositivos para la selección espermática en equinos. Sin embargo, los mecanismos moleculares involucrados en esta interacción son desconocidos. La hipótesis de nuestro trabajo es que la carga iónica de la superficie del hidrogel está involucrada en la unión del espermatozoide al hidrogel. Para generar diferentes cargas iónicas en la superficie del hidrogel, copolimerizamos acrilamida con 10% en moles de (3-acrilamidopropil) cloruro de trimetilamonio (10%APTA, monómero catiónico), N-[tris(hidroximetil)metil] acrilamida (10%HMA, monómero neutro) o ácido acrílico (10%AA, monómero aniónico a pH>4). Luego, cada hidrogel se incubó en una placa de cultivo con medio TALP para espermatozoides (pH 7.4) con y sin albúmina de suero bovino (ASB, proteína con carga negativa a pH 7.4; 6 mg/mL) a 37°C en 5% CO2 por 30 min. Finalmente, se añadió una alícuota de 1x106 de espermatozoides equinos por placa y se incubó bajo las condiciones antes mencionadas. Como control se incubaron los espermatozoides en placas sin hidrogeles. El porcentaje de espermatozoides unidos a las superficies se calculó como la diferencia entre el número de espermatozoides añadidos inicialmente a la placa y los no unidos al hidrogel luego de la incubación. Los datos (media±DE) fueron analizados mediante ANOVA de dos vías y la prueba a posteriori Bonferroni (p 10%HMA: 22,6±2,3% > control: 7,1±1,1%; p 10%APTA: 8,1±1,7% y control: 15,0±3,1%; p0,05). Adicionalmente, en todos los experimentos independientemente de la suplementación con ASB, los espermatozoides unidos a los hidrogeles 10%AA y 10%HMA presentaron motilidad, mientras que los unidos a los hidrogeles 10%APTA se observaron inmótiles. En conclusión, la habilidad de unión entre los hidrogeles copolimerizados de PAAm y los espermatozoides está influenciadapor la carga iónica del hidrogel. La suplementación con ASB modifica las propiedades de la superficie del hidrogel y la habilidad de los espermatozoides equinos de unirse a éstos, sin afectar su motilidad. Esta información podría contribuir al desarrollo de técnicas de reproducción asistida para padrillos con baja eficiencia reproductiva.