Superficies Basadas en Hidrogeles de PNIPAM, como Soporte para el crecimiento de Fibroblastos

RIVERO, R.; ALUSTIZA, FABRISIO; ACEVEDO, DIEGO; FORCATO, DIEGO; RODRIGUEZ, NANCY; MIRAS, MARÍA CRISTINA; BARBERO, CESAR; BOSCH, PABLO; RIVAROLA, CLAUDIA

La Plata

Encuentro; V Encuentro Argentino de Materia Blanda (2014 MAB5); 2014

Los hidrogeles son polímeros entrecruzados capaces de absorber grandes cantidades de agua por lo que son utilizados en el campo de la biomedicina como lentes de contacto, implantes de cornea, transporte y liberación de drogas, sustitutos de piel y órganos artificiales, entre otras. En el presente trabajo se estudia la adhesión y proliferación de fibroblastos fetales bovinos (FFB) sobre la superficie de hidrogeles termosensibles sintetizados por polimerización radicalaria, basados en poliacrilamida, poli-(Nisopropilacrilamida) (PNIPAm) y la copolimerización con AMPS (acido 2- acrilamido-2-methilpropanosulfonic) o HMA (N-[Tris(hidroximetil)metil] acrilamida). Los estudios de adhesión y biocompatibilidad fueron realizados con cultivos primarios de FFB previamente transfectados y seleccionados para expresar la proteína verde fluorescente y permitir su visualización por microscopia óptica. Los geles fueron hidratados en medio de cultivo celular completo (DMEM) y se esterilizaron bajo radiación UV. Los FFB fueron sembrados sobre las superficies de los hidrogeles sintetizados. La interacción de los FFB con la superficie fue evaluada por microscopio de fluorescencia invertido y microscopia de fuerza atómica (MFA), a distintos tiempos de cultivo. La viabilidad celular fue determinada mediante MTT y comparada con un grupo control en ausencia de hidrogel. Se determinaron las características fisicoquímicas de los hidrogeles en DMEM y agua: porcentaje de hinchamiento y temperaturas de transición de fase (TPT) (por calorimetría diferencial de barrido). Ambas propiedades varían con el medio de solvatación. La adhesión celular depende del estado colapsado o hinchado de los geles y los grupos funcionales presentes. En ciertas condiciones se observa la formación de esferoides celulares que persisten durante más de 10 días. No se evidenciaron alteraciones morfológicas en el desarrollo de los FFB y la viabilidad celular no se vio afectada al contacto con las distintas superficies. Estos resultados preliminares sugieren la posible aplicación de estos materiales en el desarrollo de nuevos soportes celulares en bioingeniería de tejidos. La formación de esferoides permitiría estudiar el comportamiento de fenotipos celulares en condiciones reales de 3D simulando tejidos in-vivo.