Comparación de tres sistemas de cultivo en su capacidad para sustentar el desarrollo in vitro de embriones caprinos

BOSCH, P.; BLANCH, M. S.; FERRERO, S.; DIAZ, C. H.; ARMESTO, R. G.; BOSCH, R. A.

Río Cuarto, Cordoba

Congreso; 22do Congreso de la Asociación Argentina de Producción Animal (AAPA); 1998

Universidad Nacional de Rio Cuarto

El desarrollo de sistemas de cultivo in vitro que permitan obtener altos porcentajes de embriones viables para su transferencia al útero de hembras receptoras es de gran importancia en programas de producción in vitro de embriones. Por otro lado el cultivo in vitro de embriones es fundamental para el desarrollo y aplicación de nuevas biotecnologías como el clonado y transferencia de genes. Si bien la información disponible sobre cultivo in vitro de embriones bovinos y ovinos es muy abundante no sucede lo mismo para embriones caprinos. El objetivo del presente estudio fue comparar el desarrollo de embriones caprinos fertilizados in vivo en: a) cocultivo con células epiteliales de oviducto caprino (CEO), b) cultivo en fluido sintético de oviducto (FSO) y c) cultivo en medio condicionado por células epiteliales de oviducto caprino (MC). Se colectaron embriones en estado de 1-8 células en el día 2-3 (día 0=día de presentación del celo) mediante “flushing” retrógrado de oviducto de cabras superovuladas. Los embriones obtenidos se asignaron al azar a los diferentes tratamientos experimentales y se cultivaron durante 4-5 ds (equivalente al día 7 in vivo) en atmósfera de 5% de CO2 en aire a 38,5 C y máxima humedad para los embriones cultivados en CEO y MC, mientras que el cultivo de embriones en FSO se llevó a cabo en atmósfera de 5% CO2, 5% O2, 90% N2. Al término del cultivo se estableció el estadio del desarrollo embrionario alcanzado mediante evaluación morfológica. El número de células por embrión de determinó a partir de embriones fijados y posteriormente teñidos con orceína. Para comparar el porcentaje de embriones que alcanzaron el estado de mórula en los diferentes tratamientos se aplicó el Test X2 de independencia. Para la variable número de células por embrión se aplicó el Test no paramétrico de Kruskal Wallis con los datos transformados por rangos. Los resultados obtenidos se muestran en el Cuadro 1 (Ver cuadro en la versión PDF). Los resultados obtenidos permiten asignarle al cocultivo una mejor capacidad para sustentar el desarrollo in vitro de embriones preimplantacionales caprinos en relación con los otros dos sistemas estudiados. Palabras clave: caprino, embrión, cultivo in vitro, cocultivo, fluido sintético de oviducto. Key words: goat, embryo, in vitro culture, co-culture, synthetic oviduct fluid.