La inhibición parcial de la Na+/K+-ATPase con ouabaína induce Apoptosis en miocitos adultos de rata.

LUCIANA SAPIA; ALICIA MATTIAZZI; MARTÍN VILA PETROFF

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2008

SAIC

El efecto inotrópico positivo producido por la inhibición parcial de la bomba Na+/K+- ATPasa mediante el uso de digitálicos, ha sido usado para el tratamiento de la insuficiencia cardíaca (IC) por mas de 200 años. Se ha demostrado recientemente que la administración en forma aguda de dosis tóxicas de ouabaina induce apoptosis en miocitos cardíacos. El objetivo de este estudio fue comprobar si dosis no tóxicas de ouabaína promueven la apoptosis en miocitos de rata y examinar los mecanismos subcelulares involucrados. Cardiomiocitos aislados de rata y gato, dos especies con diferente sensibilidad a digitálicos, se cultivaron durante 24hs en presencia y ausencia de ouabaína 2µM (rata) y 2µM-25nM (gato). La ouabaina produjo una disminución en la viabilidad celular de un 43 ± 5%, al menos en parte debido a la apoptosis, detectada por el aumento en la actividad de caspasa-3 y del cociente Bax/Bcl-2. Resultados similares se obtuvieron en la rata usando 1 µM digoxina y en gato con 25 nM ouabaina. La reducción en la viabilidad celular fue completamente prevenida por el inhibidor del NCX, KBR-R7943 y por los inhibidores de la CaMKII, KN-93 y AIP. La sobreexpresión de CaMKII exacerbó la muerte celular inducida por ouabaina y la inhibición de la CaMKII no modificó el efecto inotrópico positivo inducido por la ouabaína. Además, la muerte celular fue exacerbada al inhibir la ruta PI3K/AKT no así al inhibir la via de la ERK1/2. Concluimos que el incremento de Ca+2 responsable del efecto inotrópico positivo de la ouabaína también promueve la activación de una cascada apoptótica que involucra a la CaMKII como un efector clave en este proceso. La Ouabaína activa simultáneamente una cascada antiapotótica que involucra a AKT, la cual es insuficiente para reprimir la apoptosis. El hallazgo de que el KN-93 previene la apoptosis sin alterar el efecto inotrópico positivo de la ouabaina sugiere el uso potencial de inhibidores de la CaMKII en forma conjunta con los digitálicos en la IC.