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La leishmaniasis tegumentaria Americana (LTA), es una enfermedad endémica en Argentina para la cual no existen vacunas de aplicación en humanos. Las esporas bacterianas, como modelo de exposición de proteínas, podrían ser una alternativa válida para la formulación de vacunas. Con el objetivo de obtener un sistema de exposición de antígenos en la superficie de las esporas de Bacillus subtilis, se realizó una fusión transcripcional entre CotB (una proteína de la capa externa de la espora de B. subtilis) y LbAg3, una proteína inmunogénica de Leishmania (V.) braziliensis, agente causal de LTA. El gen estructural de CotB se amplificó por PCR a partir de B. subtilis 168 y posteriormente se reamplificó utilizando cebadores específicos que incorporan una pequeña región de clonado múltiple hacia el extremo 3?. El amplicón se clonó en el plásmido pRSETa. La región del gen que codifica para LbAg3 se amplificó a partir de una cepa de L. (V.) braziliensis MHOM/AR/03/OLO1 y posteriormente se reamplificó, adicionando hacia el extremo 3? un sitio de restricción XmaI, una secuencia que codifica para seis residuos de histidina y un sitio de restricción BamHI. Este amplicón se clonó a continuación de cotB. La fusión génica obtenida cotB-polylinker-lbAg3-6His se digirió con las enzimas HindIII y BamHI y se clonó en el vector de integración pDG364 obteniendo el plásmido denominado pSPOK. La expresión eficaz de la proteína heteróloga en la superficie de la espora y su estabilidad están en proceso de evaluación. La seguridad, estabilidad a temperatura ambiente y fácil manipulación de las esporas de B. subtilis, hace a este sistema de expresión particularmente útil para la expresión en la superficie de moléculas bioactivas como antígenos recombinantes capaces de disparar una respuesta inmune protectiva.