Propuesta de un medio de cultivo para evaluar la producción de compuestos tipo auxinas en levaduras de suelo

MESTRE M. C.; SEVERINO M.E; FONTENLA S.B

Córdoba

Jornada; XV Jornadas Argentinas de microbiología; 2014

Asociación Argentina de Microbiología

En suelo de Noroeste de Patagonia se ha aislado e identificado alrededor de 500 de levaduras de los Phylla Ascomycota o Basidiomycota. Estas levaduras tienen requerimientos nutricionales y fisiológicos distintos de los bacterianos. Todas ellas se cultivaron a temperaturas de entre 20 y 25°C. Tradicionalmente los estudios de microrganismos promotores del crecimiento vegetal (PGP) se han enfocado en las rizobacterias, y por ello se tenían en cuenta los requerimientos bacterianos. Recientemente se ha extendido el estudio de las capacidades PGP a otros microrganismos del suelo como por ejemplo actinomicetes, hongos filamentosos y levaduras. Entre las características PGP más estudiadas destaca la producción de metabolitos tipo auxinas, que pueden ser identificados en forma rápida y confiable en el sobrenadante de cultivo utilizando el método de Salkowski. En este trabajo se propuso comparar el poder de detección de auxinas en cultivos de levaduras utilizando medios de cultivos para bacterias (DEV) y levaduras (YPD), variando el agregado de triptófano, como precursor en la vía de las auxinas, y el porcentaje de la fuente de C. Se utilizaron 3 aislamientos de levaduras obtenidos de suelo del bosque de Patagonia. Como control bacteriano se utilizó la cepa de Azopirillum brasilensis AZ39. Los medios DEV (NaCl 0.5%, peptona de soja 1%) e YPD (extracto de levadura 1%, peptona de soja 2%, dextrosa 2%) se utilizaron con y sin el agregado de 0,1% de triptófano. Se repitió el mismo diseño con una concentración final de 0,5% de glucosa en ambos medios. Los cultivos se incubaron a 20°C durante 5 días y hasta 12 días. La determinación de compuestos tipo auxinas se realizó con el método de Salkowskiy y se cuantificó utilizando una curva patrón realizada con Ácido 3-Indol Acético (AIA) comercial. En todos los casos se observó que la presencia de triptófano es necesaria como precursor para  producción de compuestos auxínicos en levaduras. El medio YPD es el medio de elección para el crecimiento de las levaduras sin embargo en todas sus formulaciones presentó un color rojizo posterior a la esterilización que afecta la detección colorimétrica de auxinas. El medio DEV con agregado de 0,5 % glucosa aumentó el crecimiento de las levaduras respecto del mismo medio sin glucosa. El tiempo  de incubación es un factor importante, algunos aislamientos requirieron hasta 12 días para alcanzar un valor detectable de auxinas. Se determinó una mayor eficiencia de producción de auxinas utilizando el medio DEV+Trp+glucosa 0.5% en levaduras, por lo cual proponemos el uso de este medio sumado a tiempos prolongados de cultivo.