Caracterización molecular de las ácido graso sintasas y acil-CoA elongasas involucradas en la síntesis de lípidos cuticulares en Triatoma infestans

CALDERÓN FERNÁNDEZ G.; COCCHIARARO-BASTIAS LUCIANA M; PEDRINI NICOLAS; JUÁREZ M. PATRICIA

Jornada; V Jornadas de Bioquímica y Biología Molecular de Lípidos y Lipoproteínas; 2012

Los lípidos son componentes fundamentales de la superficie cuticular de insectos. En nuestro laboratorio hemos estudiado su importancia en la vinchuca Triatoma infestans, siendo indispensables en la penetración de agentes químicos y biológicos, así como en la comunicación química intraespecífica. La biosíntesis de estos componentes cuticulares tiene lugar en el integumento del insecto, iniciándose con la actividad concertada del complejo ácido graso sintasa (FAS) y las acilCoA elongasas (ELOVL). El objetivo del presente trabajo fue iniciar la caracterización de los genes codificantes correspondientes. Para esto, se sintetizó ADNc mediante RT-PCR a partir de ARN total purificado del integumento de T. infestans. Se diseñaron primers degenerados basados en secuencias conocidas de otros insectos con el programa iCODEHOP (consensus-degenerate hybrid oligonucleotide primer). Con estos primers se amplificaron fragmentos génicos que fueron clonados y secuenciados. Para completar el transcripto se utilizó la técnica de RACE (rapid amplification of cDNA ends). Se obtuvieron secuencias parciales de FAS con una alta identidad de secuencia con mamíferos (100%) e insectos (60%), así como de ELOVL con una alta identidad con insectos (87%) y mamíferos (60%). Se amplificaron los extremos 5´ y 3´ de una ELOVL tipo 4, obteniendo dos fragmentos. En futuros estudios se completará la secuencia de todos los genes identificados, se analizará su expresión diferencial y se continuará la búsqueda de nuevos genes codificantes para estas enzimas.