Role of MED17, a subunit of the mediator complex, in DNA damage response

GIUSTOZZI, MARISOL; FREYTES, SANTIAGO N.; LICHY, MICAELA; JASKOLOWSKI AIME; LORENZI, HERNAN; MATEOS, JULIETA; CERDÁN, PABLO; CASATI, PAULA

Congreso; V reunión del Grupo Argentino de Fotobiología; 2020

La radiación solar es de gran importancia para las plantas debido a que actúa como fuente de energía ycomo señal fotomorfogénica, regulando el crecimiento y desarrollo de las mismas. La radiación ultravioletaA y B (UV-A y UV-B) forman parte de la radiación que alcanza la superficie terrestre. Ambas longitudes deonda son importantes señales fotomorfogénicas; además, la radiación UV-B a altas intensidades puedepresentar consecuencias perjudiciales para todos los organismos vivos, tales como el daño en el ADN, lasproteínas y los lípidos.Las plantas, debido a su condición sésil, están expuestas a las condiciones del medioambiente. Enparticular, el complejo mediador actúa como un integrador de señales medioambientales, interaccionandocon la RNA polimerasa II y con factores de transcripción que responden a dichas señales. Estudiosestructurales demostraron que el complejo mediador se divide en cuatro módulos: cabeza, medio, cola yquinasa dependiente de ciclina. En Arabidopsis está compuesto por 33 subunidades. En levaduras yhumanos, mutantes en la subunidad 17 presentaron defectos en la reparación del daño en el ADN. Por ello,el objetivo de nuestro trabajo fue analizar la función de AtMED17 en respuestas a la radiación UV-B enplantas de A. thaliana.En primer lugar, se comparó el trancriptoma de plántulas mutantes med17 con el de plántulas salvajes,observándose que las mutantes med17 presentan una menor expresión de genes de respuesta a la luz, y enparticular en las respuestas al UV-B. Estas mutantes mostraron un retraso en el tiempo de floración; sinembargo, este retraso no se modificó por el tratamiento con UV-B como sucede en las plantas salvajes. Conrespecto a la respuesta al daño en el ADN por la radiación UV-B, se observó que las plantas deficientes enMED17 presentaron un mayor daño en el ADN que las plantas salvajes luego de un tratamiento con UV-B,mientras que líneas que sobreexpresan OEMED17 presentaron menor daño. Además, analizamos lamuerte celular programada (PCD) luego de la exposición al UV-B, observándose que las mutantes med17muestran menor PCD mientras que las líneas sobreexpresantes mayor PCD que las plantas salvajes. Porúltimo, con el objetivo de analizar si AtMED17 participa en la misma vía de PCD que la proteínaProgrammed cell death protein 5 (PDCD5), se realizaron cruzas de las plantas med17 con líneas quesobreexpresan PDCD5. Las plantas OE PDCD5 x med17 mostraron una respuesta similar a la línea OEPDCD5, revirtiendo el fenotipo observado en las mutantes med17. Nuestros resultados nos permitenconcluir que AtMED17 tiene un rol importante en la vía de respuesta al daño en el ADN, actuando corrientearriba de PDCD5.