EFECTO DE LAS PROTE�NAS S�RICAS SOBRE LA ESTRUCTURA � ACTIVIDAD DEL SURFACTANTE PULMONAR EX�GENO

M M MART�NEZ SARRASAGUE 1 , G FACORRO 1 , A CIMATO 1 , T POKL�POVICH 1 , F MASSOT 1 , M CASSANELLI 1 , F CAPANI 2 , E RUB�N DE CELIS 1

Mar del Plata

Congreso; SAIC; 2008

EFECTO DE LAS PROTE�NAS S�RICAS SOBRE LA ESTRUCTURA � ACTIVIDAD DEL SURFACTANTE PULMONAR EX�GENO M M Mart�nez Sarrasague 1 , G Facorro 1 , A Cimato 1 , T Pokl�povich 1 , F Massot 1 , M Cassanelli 1 , F Capani 2 , E Rub�n de Celis 1 1C�tedra de F�sica Facultad de Farmacia y Bioqu�mica UBA2Departamento de Bioqu�mica, Facultad de Medicina, UBA Resumen : El surfactante pulmonar está constituído por una mezcla de fosfolípidos y cuatro proteínas, dos de ellas esenciales para su función tensioactiva. Coexisten en él dos formas, la fracción pesada o activa y la liviana o inactiva. Las proteínas séricas comprometen severamente la función biofísica del surfactante. En el presente trabajo se analizaron in vitro los efectos de albúmina (BSA) y suero sobre la tensión superficial, la microviscosidad, la estructura y la composición de ambas fracciones del surfactante pulmonar exógeno (SPE) Prosurf®. El coeficiente de tensión superficial (CTS) y el porcentaje de reducción del área de burbuja (%DA10) se obtuvieron con un surfactómetro de burbuja pulsátil. Los cambios estructurales se analizaron por espectroscopia de espín electrónico (ESR) y microscopía electrónica (técnica osmio-uranilo-citrato de plomo). La composición del SPE nativo y de sus fracciones fue analizada por TLC reveladas con Yodo y ninhidrina. La adición de proteínas (cc > 10 mg/ml) incrementó el CTS (4.2 +/- 0.1 a 17.5 +/- 0.1 mN/m; p< 0.01), y aumentó el %DA10 (40 +/-3 a 46 +/-4 %, p<0.01). El porcentaje de fracción activa, obtenida por centrifugación, disminuyó en presencia de suero o BSA, aumentando la inactiva en el sobrenadante. El análisis de ESR del SPE nativo, con 5 y 16 doxilesteárico como marcadores de espín, mostró que la fracción inactiva presenta mayor fluidez. La adición de albúmina o suero modificó los perfiles espectrales, evidenciando cambios que se correlacionan con las alteraciones de la estructura y la funcionalidad. Las TLC mostraron igual patrón de lípidos para el SPE nativo y su correspondiente precipitado, los sobrenadantes presentaron cambios en la composición fosfolipídica. El agregado de suero y BSA alteró la intensidad y la morfología de las manchas. Los resultados obtenidos indican que la interacción de suero o BSA produciría una desorganización en la estructura nativa del SPE responsable de la pérdida parcial de su actividad biológica.