INVESTIGADORES
ALOVERO Fabiana De Lujan
artículos
Título:
Eudragit E100-Ofloxacino: cambios en el potencial e integridad de membrana inducidos por el polimero catiónico incrementan la acción del antimicrobiano con target intracelular frente a Pseudomonas aeruginosa resistentes a Fluoroquinolonas. (proceeding)
Autor/es:
ROMERO, VERÓNICA L; MANZO, RUBEN H.; BOCCO, JOSÉ LUIS; ALOVERO, FABIANA L.
Revista:
MEDICINA (BUENOS AIRES)
Editorial:
MEDICINA (BUENOS AIRES)
Referencias:
Lugar: BUENOS AIRES; Año: 2010 vol. 70 p. 230 - 231
ISSN:
0025-7680
Resumen:
La impermeabilidad de la membrana externa de Pseudomonas
contribuye a su resistencia intrínseca a los antimicrobianos.
Eudragit E100 (Eu) es un polímero catiónico que interactúa con
el grupo carboxílico de ofloxacino (OFLO) generando dispersiones
claras (EuCl-OFLO) de pH 6,4 y potencial electrocinético (+).
Resultados previos muestran que Eu potencia la acción bactericida
de OFLO frente a Pseudomonas aeruginosa resistentes.
Por microscopía electrónica se observaron alteraciones en la
superficie bacteriana y estructuras vesiculares sobre las mismas.
Se estudia el mecanismo por el cual Eu incrementa la eficacia
de OFLO usando citometría de flujo a fin de evaluar cambios
en potencial de membrana conducentes a pérdida de integridad
de las envolturas bacterianas. Los sistemas EuCl-OFLO fueron
preparados en nuestro laboratorio. Dos aislamientos clínicos de
P.aeruginosa fueron tratados con EuCl-OFLO, OFLO o EuCl. Se
estudió efecto de tiempo de contacto y concentración. Alícuotas
teñidas con DIBAC (sonda fluorescente) se evaluaron por citometría
de flujo. La sonda sólo entra a células con depleción en el
potencial de membrana e interactúa con componentes intracelulares
lipídicos. Las células expuestas a EuCl-OFLO exhiben alta
intensidad de fluorescencia, independientemente del tiempo de
contacto. Por su parte la población expuesta a OFLO solo difiere
del control en concentraciones supra-CIM y luego de 24 hs, con
desplazamiento a zonas de mayor fluorescencia, sin alcanzar
los niveles de Eu-OFLO. Esto podría atribuirse a una respuesta
secundaria a la acción de OFLO manifestada en largos tiempos
de incubación. Similar comportamiento se observó al analizar
la granularidad generada por los tratamientos comparados. Eu
interactúa con la superficie aniónica celular y produce pérdida
en potencial de membrana y alteraciones en la integridad de
membrana, aunque carece de acción bactericida directa, actuando
como permeabilizante para Pseudomonas e incrementando la
acción de OFLO.
