La conjugación de SUMO regula la actividad del complejo Integrator, responsable del procesamiento 3' de snRNAs

SREBROW, ANABELLA

Colonia del Sacramento

Congreso; 1er CONGRESO BINACIONAL DE LOS CLUBES DEL ARN DE ARGENTINA Y URUGUAY; 2022

Club del ARN del Uruguay

EL TRABAJO FUE PRESENTADO EN FORMATO DE PONENCIA ORAL.Los ARN nucleares pequeños (snRNAS) son moléculas de ARN no codificantes, que se asocian con un gran conjunto de proteínas dando lugar a pequeñas partículas ribonucleoproteicas nucleares conocidas como ?snRNPs?. Si bien la función de los snRNAs y el ensamblado de snRNPs están bien caracterizados, la regulación de la expresión de los genes correspondientes a los snRNAs aún no es totalmente comprendida. La mayoría de los snRNA se transcriben mediante la RNA Polimerasa II, incluidos U1, U2, U4 y U5, que conforman el spliceosoma mayoritario. A diferencia de los pre-ARNm, los snRNA no tienen intrones ni se encuentran poliadenilados. RNAPII transcribe los genes de snRNAs en la cercanía de los Cuerpos de Cajal, compartimentos subnucleares que dependen de la isopeptidasa de SUMO USPL1 para su ensamblado. Sin embargo, la función de USPL1 en el ensamblado de los CBs es independiente de su actividad de proteasa de SUMO. Aquí mostramos que la sobreexpresión de USPL1 altera el procesamiento del extremo 3' del snRNAs, un proceso llevado a cabo por el complejo ?Integrator?. Más allá de su papel en la biogénesis de snRNAs, este complejo es responsable de regular la expresión de diferentes RNA no codificantes, incluidos lncRNA, tertRNA, eRNA así como también de ciertos transcriptos codificantes. En varios casos, la disminución de la actividad del complejo Integrator da como resultado la poliadenilación aberrante de los transcriptos de snRNAs. Validamos varias subunidades del complejo como sustratos de conjugación SUMO y encontramos que la SUMOilación de INTS11, subunidad responsable de la actividad endonucleolítica, está regulada por USPL1. Definimos los residuos Lys 381, Lys 462 y Lys 475 como sitios de conjugación de SUMO dentro de INTS11 y observamos que la SUMOilación de esta proteína es necesaria para la eficiente actividad del Integrator, según lo evaluado por la cuantificación de snRNA poliadenilados. Además, mientras que una versión mutante deficiente en SUMOilación de INTS11 aún es capaz de interactuar con INTS4 e INTS9, su interacción con otras subunidades del complejo se ve afectada. Este mutante también muestra una localización más citoplasmática que la proteína de tipo salvaje. Estos hallazgos apuntan a un papel regulatorio de la conjugación de SUMO en la actividad del Integrador y sugieren la participación de la SUMOilación de INTS11 en el ensamblado del complejo. Además, este trabajo agrega el procesamiento de ARN dependiente del Integrador a la creciente lista de procesos celulares regulados por la conjugación SUMO.