Caracterización de la actividad pro-inflamatoria y antiviral de la proteína celular RBM10 ante la infección por el virus de dengue

MAGALNIK, MELINA; POZZI, BERTA; SREBROW, ANABELLA

Colonia del Sacramento

Congreso; 1er CONGRESO BINACIONAL DE LOS CLUBES DEL ARN DE ARGENTINA Y URUGUAY; 2022

Club del ARN del Uruguay

En el contexto de una infección de células de mamífero por el virus del dengue (DENV) se activan múltiples mecanismos que forman parte de lo que se conoce como respuesta inmune innata celular. Entre ellos, se activa el receptor de ARN citoplasmático RIG-I, evento que dispara cascada de señalización que llevan a la expresión de genes de citoquinas pro-inflamatorias y de interferón (IFN). El interferón secretado al exterior celular luego actúa en forma autocrina o parácrina, desencadenando una fuerte inducción de genes conocidos como ISGs (Interferon Stimulated Genes). Uno de ellos es la acetil-transferasa de spermidina/spermina ?SAT1?, cuyo pre-ARNm es regulado por splicing alternativo, dando lugar a una isoforma de ARNm codificante antiviral y a otra isoforma no codificante que es degradada por NMD (Non-sense Mediated Decay). Este evento de splicing es regulado por la proteína de unión al RNA y factor auxiliar RBM10. Recientemente reportamos que altos niveles de RBM10 reprimen la replicación de DENV, inducen la expresión de genes de respuesta inmune innata y aumentan la proporción de la isoforma anti-viral del pre-ARNm de SAT1. Mas aún, encontramos que RBM10 interacciona con el ARN viral y con RIG-I y estimula su ubiquitinación no-degradativa. En la misma línea, hallamos un aumento de la localización citoplasmática de RBM10 en el contexto de infección, así como también al tratar células en cultivo con interferón. Al analizar una mutante de localización más citoplasmática de RBM10, vimos que, si bien su actividad de splicing disminuye, no pierde su interacción con RIG-I ni su capacidad de regular la ubiquitinación de esta proteína. Proponemos que RBM10 ejerce su acción antiviral no sólo mediante su actividad como factor de splicing dentro del núcleo celular, sino también mediante su interacción citoplasmática con RIG-I. En el contexto de infección por DENV, planificamos analizar el interactoma de RBM10 como así también sus modificaciones post-traduccionales que puedan llevar a regular su localización sub-celular, su interacción con RIG-I y con el ARN viral, su actividad como factor de splicing y como inductor de genes de respuesta inmune.