Inmovilización directa de peroxidasa de soja en matrices a base de quitosano para aplicaciones en biocatálisis.

LAUTARO BRACCO; F. WOLMAN; MARIA V MIRANDA; CASCONE O

Congreso; ETIF 2016; 2016

Las peroxidasas vegetales son enzimas oxidoreductivas que catalizan un gran número de reacciones de oxidación en presencia de peróxido de hidrógeno, siendo la peroxidasa de rábano picante (HRP) la más estudiada. Esta enzima es muy utilizada en ciencias de la salud para producir kits diagnósticos y también en biorremediación, al oxidar compuestos tóxicos y su remoción del medio por precipitación. Sin embargo, esta materia prima no es abundante en nuestro país. Como alternativa puede usarse la cáscara de semilla de soja, que es un subproducto agroindustrial de valor nulo o muy bajo. La peroxidasa presente en la cáscara de soja (SBP) tiene un espectro de sustratos similar al de la HRP, además de presentar otras ventajas, como una mayor resistencia a la degradación térmica. Diferentes estrategias fueron descriptas para la purificación de la SBP, las cuales utilizan varios principios cromatográficos: intercambio iónico, interacción hidrofóbica, cromatografía de afinidad y combinaciones entre éstas, con o sin previa precipitación salina, o con sistema de dos fases acuosas o precipitación conjunta con sulfato de amonio y acetona. Además, la SBP fue inmovilizada en diferentes soportes y fueron demostradas las ventajas sobre la enzima en solución.La cromatografía de afinidad con colorantes es un procedimiento de purificación de proteínas basado en el reconocimiento por parte de los colorantes inmovilizados en un soporte hacia sitios específicos de ciertas proteínas, siendo un método económico y extremadamente versátil. El quitosano ha sido utilizado previamente como soporte cromatográfico, y cuenta con las ventajas de poseer un bajo costo, fácil accesibilidad, alta biodegradabilidad y biocompatibilidad, además de presentar baja toxicidad. El objetivo del presente estudio fue seleccionar y caracterizar distintos colorantes triazínicos ligados a miniesferas de quitosano para la inmovilización de SBP a partir de un extracto acuoso de cáscaras de semillas de soja de manera directa y sin la necesidad de utilizar técnicas de preacondicionamiento.